薄层色谱法解释.ppt

薄层色谱法及其应用 第一章 概 述 第二章 薄层色谱法的分类和原理 第三章 薄层色谱法实验方法及应用 第四章 薄层色谱法在中草药方面的 应用 目 录 第一章 概 述 薄层色谱法 指以适宜的固定相涂布于玻璃板、铝箔片或聚酯薄膜上使成一均匀的薄层，将供试品与相应的对照物点于薄层板的一端，以适宜的溶剂置展开容器中展开，使供试品中所含的相应成分分离，采用适合的显色剂或显色方法显色，将供试品色谱与对照物色谱相比较，或采用薄层扫描仪扫描，以进行鉴别、检查，或含量测定的方法。 薄层色谱法 薄层色谱法（Thin Layer chromatography，TLC）是 20 世纪 50 年代发展起来的一种平面色谱技术；至20 世纪 60 年代后，对薄层色谱法在使用器材的规格、操作方法及术语使用的 标准化等方面进行了大量的工作，使该方法日趋成熟和完善。迄今几十年来， TLC已在医药、滥用毒品检测、农药、食品、化工、环保等多方面有了广泛的应用。 薄层色谱技术产生和发展可分为以下3个阶段： 起步阶段 推广普及阶段 发展提高阶段 1938年 N. A. Izmailor和 M. S. Schraiber首次在显微镜载玻片上涂布的氧化铝薄层分离了多种植物酊剂中的成分，标志着薄层色谱法的诞生。 薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离速度快等优点，从而发展很快，并在中草药的定性定量分析中得到了广泛应用。 80年代以来，高效薄层板的出现以及薄层自动化仪器的使用，极大地提高了薄层分析结果的重现性和准确度。有的学者称之为现代薄层色谱技术（Modern TLC)或仪器化薄层色谱技术（Instrumental planar chromatography)。 第二章 薄层色谱法的分类和原理 根据原理分类： 薄层色谱法 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 凝胶色谱 其他薄层色谱 吸附色谱： 吸附色谱是利用被分离物质在吸附剂上被吸附的能力不同，当用展开剂展开时，不同的物质因吸附和解吸附能力的不同而造成的迁移不同，从而达到分离的目的，是薄层色谱上最常用的方法。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、硅藻土等。 分配色谱: 分配色谱是利用被分离物质在两相中分配系数的不同使组分分离。常以硅胶、硅藻土、纤维素等作载 体，它们吸附一定量的水分或其它溶剂 (如: 缓冲液、 酸液、甲酰胺、丙二醇等)作固定相，再用与固定相不相混溶的展开剂展开, 被分离物质在两相之间不断地进行分配, 从而达到分离。 离子交换色谱: 离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换 　树脂上交换能力的不同使组分分离。常用的有 　离子交换纤维制成的薄层板，用于分离某些亲 　水性强、能成离子态的物质。 凝胶色谱： 葡聚糖凝胶的分离原理是葡聚糖凝胶在吸水后形成凝胶粒子，在其交联的骨架中有许多一定大小的网眼。网眼大，大分子物质能进入网眼内；网眼小，只有小分子物质才能进入网眼；而超过一定限度的大分子物质，就被排阻在凝胶粒子的外部而不能进入网眼。如同按照分子大小过筛一样，所以称为分子筛。用于高分子的非离子化合物的分离，如蛋白质及核酸等。 其他薄层色谱 络合薄层色谱法 AgNO3 微乳薄层色谱法 以微乳液为流动相 胶束薄层色谱法　应用一定浓度的表面活性剂溶液 所形成的胶束溶液作为流动相　 反相薄层色谱法 利用化学键合反应，将烃基硅烷键 合到硅胶表面，制成非极性固定 相，用极性较大的液体作流动相 手性固定相法　 　光学活性的天然高分子－纤维素， 　　　　　　　　　纤维素衍生物等 第三章 薄层色谱法实验方法及应用 特点：1、分离能力强，斑点集中； 2、灵敏度高； 3、展开时间短； 4、试样预处理简单； 5、上样量大； 6、仪器简单操作方便 薄层色谱法 薄层固定相 、薄层点样、薄层展 开、显色、记录 薄层色谱法 薄层固定相 按照固定相的种类，薄层板可分为正相薄层板（如硅胶薄层板、聚酰胺薄层板）、反相薄层板（如C18键合相薄层板）等。 硅胶薄层板是目前使用最广的薄层板，有硅胶G板、硅胶GF254板、硅胶H板和硅胶HF254板等规格。 高效薄层板（HPTLC，High Performanc