Western Blot标准操作规程.docVIP

研究机构名称：中国药科大学药代动力学重点实验室 SOP编号： SOP名称：Western Blot免疫印记法标准操作规程 1. 目的 本SOP的目的是为了保证Western Blot免疫印记实验的标准化和可重复性。 2. 前言 本SOP涉及蛋白样品的Western Blot免疫印记实验的标准化操作过程。 3. 范围 本SOP适用于中国药科大学药代动力学重点实验室的全体实验操作人员。 4. 职责 4.1 细胞室PI应指派专人负责Western Blot免疫印记实验前的培训。 4.2所有实验操作者应经由专人培训，明确Western Blot免疫印记实验的原理及步骤后方可独立操作。 5. 实验操作 5.1 试剂配制 5.1.1 储备液 （1）PMSF (100mmol/L) 称取PMSF17.4mg，异丙醇定容至1 ml，－20℃保存。（2）裂解液 购于碧云天，1mL/tube分装，－20℃保存，使用前加入PMSF10μL/1mL裂解液（PMSF终浓度1 mmol/L）。 （3）Tris-HCl 1M pH 6.8 称取Tris 12.11g，超纯水定容至100ml，浓盐酸调pH值。 （4）Tris-HCl 1.5M pH 8.8 称取Tris 18.16g，超纯水定容至100ml，浓盐酸调pH值。 （5）10％ SDS 称取SDS 10 g，超纯水定容至100