味精生产工艺要点.pptVIP

通过控制磷脂的合成，导致形成磷脂合成不足的不完全的细胞膜 ④甘油缺陷型：通过限制发酵培养基中甘油的浓度来控制细胞膜的渗透性。甘油缺陷型菌株不能合成α-磷酸甘油和磷脂，必须由外界供给甘油才能生长。在甘油限量供应下，由于控制了细胞膜中与渗透性有直接关系的磷脂含量，使谷氨酸得以积累。 （二）谷氨酸发酵工艺 谷氨酸发酵工艺条件的控制 谷氨酸发酵过程可分为三个阶段 长菌阶段 转化阶段（长菌型细胞向产酸型细胞转化） 产酸阶段 发酵条件控制一般包括：温度、pH、种龄与接种量、泡沫、排气CO2、通风及△OD值的控制。 噬菌体感染和处理方法 利用细菌或放线菌进行的发酵容易感染噬菌体。 噬菌体是病毒的一种，直径约0．1微米，可以通过细菌过滤器，所以通用的空气过滤器不易将其除去。 引起噬菌体感染的原因 设备的渗漏 空气系统、培养基灭菌不彻底 预防噬菌体感染的措施 发酵罐的排气管要用汽封或引入药液(如高锰酸钾、漂白粉或石灰水等溶液)槽中。 取样、洗罐或倒罐的带菌液体要处理后才允许排入下水道。 把好种子关，实现严格的无菌操作。 搞好生产场地的环境卫生。车间四周要经常进行检查，如发现噬菌体即时用药液喷洒。 感染噬菌体后采用的方法 轮换使用专一性不同的菌株 加化学药物(如谷氨酸发酵可加2~4ppm氯霉素，0.1%三聚磷酸钠，0.6%柠檬酸钠或铵等)。 将培养液重新灭菌再接种(噬菌体不耐热，70~80?C经5分钟即可杀死)。 其他方法：如谷氨酸发酵在初期感染噬茵体，可以利用噬菌体只能在生长阶段的细胞(即幼龄细胞)中繁殖的特点，将发酵正常并已培养了16~18小时(此时菌体己生长好并肯定不染菌)的发酵液加入感染噬菌体的发酵液中，以等体积混合后再分开发酵。实践证明，在谷氨酸发酵中，采用这个方法可获得较好的效果。 谷氨酸发酵是复杂的生物化学反应过程，而且不同菌种、不同原料、不同发酵工艺其发酵过程的变化都有差异，但在一定条件下，发酵过程的主要变化具有一定的规律性。 （三）谷氨酸生产菌在发酵过程中的形态变化 人们发现，谷氨酸生产菌在发酵过程中会发生明显的菌体形态变化。 实践证明，在发酵过程中菌体形态有明显变化时正是发酵液中谷氨酸激增时间。 在发酵培养基含有过剩生物素时菌体则没有明显变化，而是呈现耗糖、长菌、不产谷氨酸的异常发酵。 1.种子的菌体形态 将斜面和一、二级种子培养的菌体，细胞形态基本相似，稍有差异。斜面培养的菌体较细小，一、二级种子比斜面菌体大而粗壮，革兰氏染色深。 菌体细胞多为短杆至棒杆状，有的微呈弯曲状，两端钝圆，无分枝；细胞排列呈单个，成对及Ｖ字形，也有栅状或不规则聚块；折断分裂的细胞大小为0.7～0.9×1.0～3.4μm。 2.发酵不同阶段的菌体形态 从谷氨酸发酵中菌体形态的变化来看，大致可以分为长菌型细胞、转移期细胞和产酸型细胞三种不同时期的细胞形态。以发酵周期为30～36h 的正常谷氨酸发酵为例，分述如下： 发酵0～8h或0～10h为长菌型细胞，细胞形态与二级种子基本相似。这种细胞多为短杆至棒状，有的微呈弯曲状，细胞排列呈单个、成对及Ｖ字形。 发酵不同阶段的菌体形态(续) 发酵8～18h或10～20h时为转移期细胞，此阶段细胞形态急剧变化，细胞开始伸长、膨大，在生物素贫乏的条件下，通过再度倍增，谷氨酸非积累型细胞转变成谷氨酸积累型细胞（产酸型细胞）。转移期有长菌型细胞，也有产酸型细胞，产酸速度逐渐加快。 发酵不同阶段的菌体形态(续) 发酵16～20h以后为产酸型细胞，细胞为含磷脂不足的异常形态，呈现伸长、膨大、不规则，缺乏Ｖ字形排列，有的呈弯曲形，边缘颜色浅，稍模糊；有的边缘折绉及至残缺不全，但菌体形态基本清楚。在发酵后期，细胞细长，多呈现有明显横隔（1～3个甚至更多）的多节细胞，类似花生状，产酸高，在糖酸转化率高时尤甚。 发酵不同阶段的菌体形态(续) 在有过量生物素的培养条件下，不同阶段的细胞形态则基本上没有明显的变化。菌体比较粗壮、短胖，类似于种子培养阶段的细胞形态，多为短杆至棒状，细胞排列呈单个、成对及Ｖ字形，形成的细胞为谷氨酸非积累型细胞。其发酵过程呈现典型的异常发酵，长菌体、耗糖快、耗尿素快、发酵周期短、低酸可不产谷氨酸。 3.谷氨酸发酵感染噬菌体后的菌体形态 感染噬菌体的时期不同，菌体形态变化也不一样。 (1)发酵前期感染噬菌体 菌体细胞明显减少，细胞不规则、发圆、发胖，缺乏Ｖ字形排列，视野中有明显的细胞碎片，严重时出现拉丝、拉网，互相堆在一起，几乎找不到完整的菌体细胞，类似蛛网或鱼翅状。 在生产上表现为排气口CO2迅速下降，相继出现OD值下跌、pH上升或不上升、耗糖缓和慢等异常发酵。 当生产上出现上述情况时，应立即停止发酵，进行抢救。 谷氨酸发酵感染噬菌体后的菌体形态 (2)发酵中、后期感染噬菌体 菌体细胞形态不