凌肯汇报8.1试题.ppt

学生显微镜使用与简单染色观察 组员：鲍晓华 陈攀红 凌肯 傅佳琪 倪爱佳 制片和染色的基本程序? 1、制片?在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成悬液并涂成直径约1厘米的薄层，为避免因菌数过多聚成集团，不利观察个体形态，可在载玻片之一侧再加一滴水，从已涂布的菌液中再取一环于此水滴中进行稀释，涂布成薄层，若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可。?2、自然干燥?涂片最好在室温下使其自然干燥，有时为了使之干得更快些，可将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。 ?3、固定?4、染色5、脱色 ?6、水洗?染色到一定的时候，用细小的水流从标本的背面把多余的染料冲洗掉，被菌体吸附的染料则保留。?8、干燥?着色标本洗净后，将标本晾干，或用吸水纸把多余的水吸去，然后晾干或微热烘干，用吸水纸时，切勿使载玻片翻转，以免将菌体擦掉。?9、镜检?干燥后的标本可用显微镜观察。?  ╳ 取样不规范，酒精灯未灭 取样 ╳ 不应放在火焰中心，试管口不能直接用手倾斜置于火焰上 ╳ 调显微镜 显微镜的使用方法注意事项 1、取镜安放 ?右手握住镜臂，左手托住镜座。切不可单手斜提，以防目镜滑出。使用显微镜观察时，显微镜应放在身体前方略偏左的地方，以便用左眼观察，右手绘图。 ?2、对光 ?转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。注意物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离。双 眼睁开，左眼注视目镜，将遮光器上较大的光圈对准通光孔，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。从目镜中就可见到一个白亮的圆形视野。如光线过于强烈，可调小光圈或用平面反光镜。 ?3、压片 ?压片是将切片、涂片或装片等玻片标本用金属压片夹固定在载物台上。压片时，要使玻片上的标本正对通光孔的中心，标本小时尤其注意这一点。否则，标本会偏出视野，调焦时找不到标本。 ?4、调焦观察 首先应用低倍物镜观察。当对好光后，把玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，并使玻片标本中的标本正对通光孔的中心。然后顺时针转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（一般距盖玻片2—3mm）。镜筒下降时，眼睛须从旁边注视物镜，以免物镜碰到玻片标本，压碎盖玻片，损坏镜头。然后左眼向目镜内观察，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到对准焦点，看清物像为止。再转动细准焦螺旋，来回调节，使看到的物像更加清晰。如果物像不在视野中间，则可一边观察，一边用手移动玻片标本，直到所要观察的物像进入视野中间。值得注意的是，从目镜中看到的物像是倒像。因此，玻片移动的方向与视野里物像的移动方向正好相反。 染色处理不当 后续要处理 显微镜拿时须用右手握镜臂，左手托镜座。放时让镜座的前端先接触桌面，然后轻轻 放下整个镜座，避免镜身受到震动。 ?为了防止透镜被污染，应做到： 1、不要用手指触摸透镜，以免汗液沾污； 2、下降镜筒时，一定要从旁边注视物镜，防止物镜碰到盖玻片，损坏玻片标本和物镜； 3、当观察新鲜的标本时，一定要盖上盖玻片，并吸去玻片上多余的水或溶液等； 4、每次用完显微镜后，应用擦镜纸将目镜、物镜擦干净。 ?不要随意转动准焦螺旋， 观察时必须先用粗准焦螺旋调节焦距， 看清物像后再用细准焦螺旋进行微调。 由于细准焦螺旋转动有一定的范围，当旋转不动时，应将粗准焦螺旋向相反方向转动，然后再用细准焦螺旋调节。切不可硬行转动，以防损坏齿轮。 ?观察完毕，将玻片从载物台上取下时，必须先升高镜筒，以免玻片碰击物镜。然后转动转换器，将物镜转到正前方，呈“八”字形。 注意事项：