第七章细胞生物学的发展技巧.pptVIP

第七章 细胞生物学的发展 生物学革命的三个阶段 自1900年起，生物学的进步是空前的，一场真正的生物学革命突然降临在20世纪中叶。德罗斯纳将这场革命分为三个阶段： 分子生物学的降临 （1955-1965） 细胞生物学的改进 （1965-1975） 生物工程学的出现 （1975-1985） 细胞生物学经历了四个主要发展阶段： 1）1665-1830s，细胞发现，显微生物学。 2）1830s-1930s，细胞学说，Cytology诞生。 3）1930s-1970s，电镜技术应用， Cytology发展 为细胞生物学。 4）1970s以来，分子细胞生物学时代。 细胞研究的三个层次 1、细胞水平（显微水平）：利用光学显微镜，可观察到细胞膜、细胞核及某些细胞器（线粒体、高尔基体等）的结构。 2、亚细胞水平（亚显微水平）：利用电子显微镜，可观察到细胞膜、细胞核及所有细胞器的微细结构。 3、分子水平：中心法则，DNA, RNA, 氨基酸, 蛋白质，遗传密码等等。 American Type Culture Collection (ATCC) 胚胎干细胞克隆 细胞周期及其调控机制的研究与发现  ----2001诺贝尔生理医学奖 每年一度的诺贝尔科学奖是科学界的重大事件之一。 2001年10月8日，瑞典卡罗林斯卡医学研究院宣布： 由美国西雅图 Fred Hutchinson 癌症研究中心利兰.哈特韦尔（Leland Hartwell）、英国伦敦皇家癌症研究基金的保罗．纳斯（Paul Nurse)和提莫西.亨特（Timothy Hunt）共享2001年度诺贝尔生理学／医学奖，以表彰他们“发现了细胞周期的关键调节因子” 获奖者及其研究方法 细胞周期 细胞周期调控机制 细胞周期与疾病 对我们的启示 利兰?哈特韦尔(Leland Hartwell) 是美国霍秦逊(Fred Hutchinson)癌症研究中心院长，也是西雅图(Seattle)华盛顿(Washington)大学遗传学系的教授. 1970年代初期开始研究细胞周期的机制。 他以酵母菌作为研究对象，利用基因突变技术，试图找出控制细胞周期的关键因子，结果筛选出超过一百个调节细胞周期的基因，将它们命名为cdc (cell division cycle)基因。 其中特别重要的是cdc28基因(“start”基因)，他发现当此基因突变时细胞周期会停止在G1晚期的“START”关卡，一旦细胞通过“START”关卡便开始进行DNA的复制， 因此CDC28蛋白质是一个控制细胞由G1时期进入S时期的重要因子。 1980年代，利兰?哈特韦尔利用高能量辐射线照射酵母菌细胞来研究细胞受到破坏时的反应，提出细胞有检查点(checkpoint)的构想。 检查点是指，具有调节功能的蛋白质会在此时期让细胞周期呈现暂停状态，此时细胞检查DNA是否受到破坏或有任何的缺陷，并且在进入下一个时期之前进行DNA修补(repair)工作。 checkpoint构想为研究癌细胞分裂增殖为何失去控制提出了一个重要的基本观念，认为癌症的发生可能与检查点的调控机制出现问题有关。 蒂莫西?汉德 (Timothy Hunt) 英国帝国癌症基金会(Imperial Cancer Research Fund)细胞周期研究中心的主任。 1983年，他以青蛙与海胆(fertilized eggs of frogs and sea urchins)的受精卵作为实验对象找到两种蛋白质：他们会在细胞分裂的间期(interphase)聚积，随后又在细胞分裂(mitosis)的末期快速地分解，之后又会再度累积，使得此种蛋白质呈现周期性的变动。 他将此种蛋白质称为周期素(cyclin)，也就是它会随着周期性的累积与分解进出M时期。 因此推测它的功能是推动细胞分裂(mitosis)的进行。 保罗?诺尔斯(Paul Nurse) 英国帝国癌症基金会(Imperial Cancer Research Fund)的院长，于1975年开始细胞周期机制的研究 他以酵母菌为研究对象找到了cdc2基因，此基因的功能与cdc28相当，所转译的蛋白质不但能控制细胞周期中G2时期进入M时期的检查点，也能控制G1时期进入S时期的检查点。 进一步发现cdc2基因所转译的蛋白质是一种蛋白质激酶(protein kinase)，主要是依赖蛋白质的磷酸