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第五章柠檬酸发酵工艺
总能耗降低,因为种子罐单独培养时,种子罐小,通气、搅拌的动力消耗远低于生产罐培养; 有利于防止杂菌污染。独立的种子培养车间比发酵车间小得多,环境卫生容易控制。在种子罐中单独培养时,接入孢子的密度约是直接接入生产罐的10倍,加上种子发育快,受感染的可能性大大降低。而且,生产罐接入菌丝体以后,很快进入产酸阶段,受感染的可能性也大为减少。如果种子培养发生问题(菌种退化或染菌)在种子罐中发现,损失比主发酵罐中发现小得多。 种子罐接种的缺点: 菌丝接种产酸低于孢子直接接种; 菌丝接种时,如果接入发酵罐的种子内存在杂菌,这些杂菌从受到低pH抑制的种子培养基环境,恢复到自然pH环境的发酵液中,正好适宜多数杂菌繁殖。若生产菌株不能迅速产酸以降低pH,染菌几率则增大。 9、斜面培养基与菌种传代的关系 斜面培养基浓度过高或营养过剩则斜面下端不生孢子或孢子生的细小、菌膜增厚出现皱纹。反之则菌膜变薄、孢子细小。这种斜面菌种属不良菌种。 薯干发酵菌种,用薯干粉察氏斜面培养基代替麦芽汁斜面培养基效果较好。 10、麸曲三角瓶菌种的培养工艺 我国仍沿用三角瓶麸曲培养生产菌种孢子的工艺,这是我们发酵方面落后于国外用干孢子培养器培养干孢子的关键工艺。 麸曲培养基需用大片的白麸皮,质轻、蓬松、含淀粉量少,有利于孢子繁殖。 11粘度 在柠檬酸深层发酵过程中,粘度过高,会导致发酵液的传热性下降,溶氧效率降低,液体流动性差,搅拌动力消耗增加等不利影响,营养物质的运输也会受阻,甚至发酵不能进行。 影响粘度因素有: 1、溶质的量,多数溶质会使粘度升高; 2、气体(O2、CO2等)含量,气体使粘度降低; 3、菌体浓度、性质及形态,菌体浓度高和扩散性生长使粘度升高,但菌体其他性质(如表面电荷、表面吸附物)也会影响到粘度; 4、温度,温度上升一般会使粘度下降。 12、促进发酵的其他因素 种子罐培养基配方:薯干粉浓度高比浓度低好,最高可到22%;添加0.5%硫酸铵、0.3%尿素或0.3%硝酸铵较好; 发酵培养基:发酵培养基中不需要添加促进剂和微量金属离子。氮量要控制适当,过多的氮源则导致菌体“疯长”而产酸下降。 四、玉米原料发酵工艺 (一)工艺路线 目前我国玉米发酵柠檬酸基本上有4条工艺路线,但应用最多的是玉米干磨去渣发酵工艺。 (二)工艺中的几个关键问题 1、菌种驯化 采用薯干原料的菌种比较粗放,用玉米粉培养基将现有菌株驯化,不难得到优良菌株。 2、玉米粉的液化 已知谷类淀粉比薯类淀粉较难液化,谷物直接液化难度更大。因此,要用耐高温α-淀粉酶,二次喷射液化。 3、控制好碳、氮比 发酵培养基中蛋白质含量控制在0.2%~0.4%之间,目前除玉米深加工工艺外,其他均以添加玉米滤渣,或留出部分不过滤的液化液来平衡碳氮比,一般在10%~20%之间。 (三)其他问题 玉米液化液发酵的其他操作和注意事项与薯干粉发酵基本相似。由于培养基含渣少,可采用“连消”工艺,对生产更有利。 玉米发酵液颜色浅,杂质含量比薯干少,容易净化,产品洁白而光亮。 (四)玉米粉直接发酵 新菌种ASP.HZ528具有适应高氮源发酵的性能,对金属离子不敏感,直接玉米粉发酵产酸比Co827高。 第三节 柠檬酸表面发酵工艺 工艺简介 表面发酵工艺设备投资少,动力消耗低,原料粗放、廉价,生产易控制,全部自动化操作。 一、表面发酵柠檬酸生产用的微生物 (一)生产菌种 在工业生产上应用的菌种,均为黑曲霉。如黑曲霉UV-6、黑曲霉3939和黑曲霉川柠1~2号。 表面发酵工艺国内外普遍采用干孢子接种,这是保证发酵稳定的重要技术措施。 (二)干孢子的制备 1.干孢子制备工艺流程: 菌种 沙土保藏 试管斜面培养(30℃) 培养器液体培养( 32~35℃ ) 干燥( 40~50℃ 无菌空气 ) 干孢子收集 质量鉴定 合格成 品保藏 使用前质量检查 合格 作为表面发 酵用种子。 2、制备干孢子的培养基 干孢子质量和产量与培养基的组分有很大关系。孢子培养基对产酸能力影响不明显,但对孢子生成量有较大区别。要获得优质高产的干孢子需要对不同菌种进行最适孢子培养基的研究。 国内一些工厂黑曲霉UV-6菌的培养基采用糖蜜为碳源,成本低,干孢子收集量较多。但要注意糖蜜质量的变化,一般糖厂生产期后期的糖蜜不用于干孢子制备。 3、干孢子制备的主要设备 (a)可拆卸式铝制培养盘 铝盘可为椭圆形或长方形,
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