四川大学发酵工程期末复习思考题.doc

思考题 第一章 1、什么是发酵工程？ 答：是利用微生物的生命活动进行物质加工的工程。 2、发酵工业是怎样建立起来的？ 是从家庭作坊似的酿造食品工业发展而来的。 3、 4、目前发酵工程一应用于哪些领域，主要产品有哪些？ 答：（1）工业方面：1、食品工业——含醇饮料、发酵乳制品、甜味剂、添加剂、食品检测；2、轻工业——糖化酶、蛋白酶、果胶酶……3、医药工业——抗生素、氨基酸、维生素、生物制品、酶制剂、基因工程药物、（2）农业方面：生物农药、生物除草剂、生物增产剂、食用菌和药用菌。（3）在环境保护中的作用（4）在冶金中的作用（5）在高技术研究中的应用。 5、发酵工程发展过程中有哪几代技术？简述歌技术内容？ 答：纯培养技术（初期发酵技术）、深层发酵（近代发酵技术）、发酵工程（第三代发酵技术）。 6、发酵工程在生物工程中的地位？ 答：生物技术的四大工程之一：酶工程、细胞工程。发酵工程。基因工程。 7、 弗莱明：第一个发现青霉素的人 列文虎克：第一个发现微生物的人 巴斯德：证明了不同的微生物产生不同的代谢物 布雷非尔：建立了霉菌的纯培养方法 汉逊：第一个用纯酵母菌发酵啤酒 柯赫：发明了固体培养基 比希纳：发现了酒化酶 第二章 1、决定发酵工程生产水平的三要素？ 答：生产菌种的性能（即高产菌株）、科学的生产管理（包括补料发酵等）、先进的生产设备。 2、筛选一株用于发酵生产的菌种有哪些操作步骤？ 答：标本采集、材料预处理、富集、菌种分离初筛、性能测定、菌种运用、菌种保藏。 3‘菌种分离的方法？ 答：选择培养分离法和随机分离法 4、怎样分离抗肿瘤药物生产菌？ 答：生化诱导分析法（BIA），采用测定溶原性入噬菌体阻遏物支配下的启动子控制的转录和表达酶活性的方法。即将大肠杆菌的LacZ基因连接到入噬菌体的PL启动子下，当DNA损伤时，诱发入阻遏蛋白CI分解，PL启动ＬａｃＺ基因转录。测定表达的β－半乳糖甘酶活性，检测能损伤ＤＮＡ的抗肿瘤药物的存在。 5、怎样分离酶制剂产生菌？ 答：在体外测试某种化合物抑制某一关键的人体酶，一旦成功则能在人体内起药理作用。 ６、怎样分离芽孢杆菌和酵母菌？ 答：芽孢杆菌是抗生素生产菌，故可利用抗生素筛选法：抑菌法、稀释法、扩散法、生物自显影法。酵母菌则可利用选择培养分离法进行分离。 7.抗菌谱：抗菌谱（Antibacterial Spectrum）系泛指一种或一类抗生素（或抗菌药物）所能抑制（或杀灭）微生物的类、属、种范围。 广谱抗生素：广谱抗生素是指抗菌谱比较宽的药物，简单说就是能够抵抗大部分细菌的药物， 窄谱抗生素：它是专门杀灭某一种或一类细菌的药物。 超级细菌的出现：条件致病菌与抗药性 第三章 １、一个优良的发酵生产菌株应具备哪些特性？ 答：发酵周期短，代谢能力强；副产物少；繁殖能力强；利用原料广泛；原料转化率高；耐受前体能力强；产生泡沫少；抗病能力强；遗传特性稳定，以减少菌种的复壮次数。 ２、什么是自然选育？自然选育可达到哪些效果？ 答：自然选育是利用平板稀释法，分离出有特点的单菌落，再借助摇床或实验室生物反应器测试它的生产性能，从而选出高水平菌株。 效果：纯化菌种、防止退化、稳定生产、提高产量。 ３、诱变育种有哪些方法？怎样操作？ 答：物理法、化学诱导法、生物诱导法、复合处理。 ４、怎样分离筛选变异株 操作：出发菌（诱变处理）——选出２００株——（初筛，每株１瓶）５０——（复筛，每株３～４瓶）选出５株——（诱变处理）４０株——（初筛，每株１瓶）５０株——（复筛，每株３～４瓶）５株 ５、菌株发生突变有哪些类型？ 答：形态突变型，生理突变型 ６、怎样检出营养缺陷型菌株？ 答：可用基础培养基和补充培养基对照培养将其检出。 ７、原生质体融合技术有哪些优点？ 答：杂交频率高；受结合型或致育型的限制小；重组体种类多；遗传物质的传递更为完整；能获得性状优良的重组体；可提高育种效率；可采用产量性状高的菌株做融合亲株；提高菌株产量潜能较大；存在两株以上亲株同时参与融合形成融合子的可能。 ８、一个基因表达载体必须具备哪些条件？ 答：能够独立复制；有多克隆位点和筛选标记；很强的启动子；有抑制启动子的阻遏子；很强的终止子；所产生的ｍＲＮＡ必须有翻译起始信号，即起始密码ＡＵＧ的ＳＤ序列。 ９、生产基因工程菌的主要程序是什么？ 答：克隆目的基因－构建ＤＮＡ重组体－重组ＤＮＡ导入受体细胞－基因表达及工程菌的筛选。 １０、重组ＤＮＡ的操作步骤？ 答：提取目的基因－将目的基因与克隆载体连接－将重组载体导入受体细胞－筛选和鉴定－大量培养，检测外源基因是否表达，获得所需产物。 11.分离优良菌株的方法有哪些？分别有何优缺点？ 自然选育： 概念：是一种非人工诱变产生的生产菌株。 优点：简单易行/可以达到纯化菌种，防止退化，稳