第十一细胞增殖及其调控技术分析.ppt

第十一章 细胞增殖及其调控制 掌握： 细胞周期的概念、基本理论； 细胞周期各时相的主要事件，主要的限制点； 有丝分裂、减数分裂的过程、机制及意义； 细胞周期检验点、调控系统及其主要作用。 熟悉：细胞周期同步化的方法； 细胞周期调控因子。 了解：测定细胞周期各长短的方法。 细胞增殖(cell proliferation)的意义 ◆细胞增殖(cell proliferation)是细胞生命活动的重要特征之一,种族繁衍、个体发育、机体修复等都离不开细胞增殖。 初生婴儿有1012个细胞，成人1014个，约200种细胞类型。 成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿衰老和死亡的细胞。 细胞周期长短测定 ◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 ◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) ◆缩时摄像技术， 可以得到准确的细胞周期时间及分裂间 期和分裂期的准确时间。  . 后期A假说(微管去聚合假说) 染色体着丝点微管在着丝点处去组装而缩短，在分子马达的作用下染色体向两极移动 . 后期B 假说(纺锤体微管滑动假说) 植物细胞胞质分裂 ◆与动物细胞胞质分裂不同的是，植物细胞胞 质分裂是因为在细胞内形成新的细胞膜和细 胞壁而将细胞分开。(高尔基体小泡) 减数分裂期Ⅰ特点 ①一对同源染色体分开，分别进入两个子细胞，同源染色体分开之前通常要发生交换和重组。 ②在染色体组中，同源染色体的分离是随机的，也就是说染色体组要发生重组合。 联会复合体(synaptonemal complex，SC) 减数分裂期Ⅰ 中期I：１条同源染色体有两个动粒。 后期I 二价体的两条同源染色体分开，分别向两极移动。 同源染色体随机分向两极，染色体重组，人类染色体重组概率有223个。 末期I 减数分裂间期。 减数分裂II 可分为前、中、后、末四个四期，与有丝分裂相似（姊妹染色单体分离）。 一个精母细胞形成4个精子；一个卵母细胞形成一个卵子及2-3个极体。 染色体交换（同源染色体的部分交换） 染色体重组（染色体分离时的自由组合） 减数分裂与有丝分裂的比较 MPF的生化实质 MPF是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶；启动细胞从G2期进入M期的相关事件。 一种蛋白激酶， M期周期蛋白依赖性蛋白激酶 (Cyclin-dependent protein kinase，ＣＤＫ)， 由Cyclin-Cdk形成的复合物。 MPF=p34cdc2蛋白激酶(Cdk1)+cyclinB周期蛋白 2001年10月8日美国人Leland?Hartwell、英国人Paul Nurse、Timothy?Hunt因对细胞周期调控机理的研究而荣获诺贝尔生理医学奖。 三、细胞周期蛋白cyclin 特点：在细胞周期中呈周期性变化。含有一段约100个氨基酸的保守序列，称为周期蛋白框，介导周期蛋白与CDK结合。 作用：激活CDK，引导CDK作用于不同底物。 G1型周期蛋白在细胞周期中存在的时间相对较短， M型周期蛋白在细胞周期中则相对稳定。 四、CDK周期蛋白激酶 细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)。 只有与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性。 在动物中已知8种CDK。均含有一段相似的激酶结构域，这一区域有一段保守序列，即PSTAIRE，与周期蛋白的结合有关。 cell cycle regulation 六、细胞周期运转的阻遏(细胞周期运转的负调控) ◆细胞至少可通过两种不同机制阻遏细胞周期的运转： Cdk抑制蛋白(CDKI)阻止Cyclin-Cdk复合物的装配或活 性；周期调控系统组分停止合成。 ◆细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子CDKI，其作用是抑制Cyclin-Cdk复合物的装配或活性，而将细胞阻止在不同的检验点。如DNA受损后，细胞将停留于G1 Checkpoint 让DNA修复或者凋亡 ，避免带有受损DNA的细胞分裂，能抑制肿瘤的发生。 ◆周期调控系统组分停止合成，如G0细胞，大部分Cyclin和Cdk都消失，这在多细胞生物尤其明显。 p53蛋白在细胞周期调控中的作用 思考题 P412 1、4、6、9、10 什么是细胞周期? 细胞周期各时期主要变化是什么? 试比较有丝分裂与减数分裂的异同点。 说明细胞分裂后期染色单体分离和向两极移动的运动机制。 细胞周期中有哪些主要检验点,各起何作用? 举例说明CDK激酶在细胞周期中是如何执行调节功能的? 五、细胞周期运转调控 Cyclin-Cdk---调控细胞周期的引擎：不同的周期蛋白与不同的CDK结合，构成不同的Cyclin-Cdk； 不同的Cyclin-Cdk在不同的时相表现活性，影响不同的下游事件。 G2/M期