第五章连锁技术分析.pptVIP

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3.外祖父法。对于X染色体上的基因来说,只需要知道母亲的基因型是否为双重杂合体(即两对基因都处于杂合状态)。根据为双重杂合体的母亲所生的儿子中有关性状的重组情况,就可估计重组值,而母亲X染色体上的基因组成,可以由外祖父的表型得知。 (二)体细胞杂交定位法 运用体细胞遗传学和体细胞杂交的新技术可以在离体条件下,应用细胞培养方法,研究体细胞融合、突变、分离以及连锁和交换等进行人类基因定位、绘制细胞学图。 1.克隆分布板法:为了将某一基因定位于某一染色体上,必须建立包括人体24条染色体在内的一整套杂种细胞。其中每个杂种细胞都包括有一组人体染色体,这样的一套杂种细胞称为~。 2.利用染色体异常将基因定位在染色体上的具体位置 (1)基因剂量效应法:利用在具有某一特定染色体片段缺失或重复的病人或培养细胞内所观察到的基因剂量效应进行基因的区域定位。 (2)染色体缺失定位法:用人工方法在体外造成杂种细胞内特定染色体的不同位置发生断裂,获得一套特定染色体的缺失杂种细胞,然后通过检测缺失杂种细胞内基因产物存在与否对许多基因进行区域定位。 (三)DNA介导的基因定位 1.克隆基因定位法;采用已克隆基因的cDNA探针与保留在杂种细胞内的人染色体DNA顺序进行分子杂交,来确定克隆基因所在的染色体。 2.原位杂交法:以标记的探针直接同中期染色体进行原位杂交。 二、体细胞遗传学与细胞学图的制作 体细胞遗传学(somatic cell genetics):可以绕过减数分裂过程,应用细胞培养方法,研究体细胞融合、突变、分离以及连锁和交换等,把基因定位在染色体上,制作细胞学图。 把人体细胞和营养缺陷型的小鼠细胞混合培养,再加上促融因子——紫外线灭活的仙台病毒或PEG,那么这两种细胞就有可能融合。异核体的两个核融合,形成杂种细胞。这种细胞往往含有整套的小鼠染色体和丢失后保留下来的人的染色体。通过不同选择技术,在加上机遇性的变化,可以形成各种杂种细胞系,含有不同数目和不同号码的人体染色体。 Cell-fusion techniques applied to human and mouse cells produce colonies,each of which contains a full mouse genome plus a few human chromosomes(blue). A fibroblast is a cell of fibrous connective tissue. 有了不同的杂种细胞系,每个细胞系中除了小鼠染色体外,还有少数人的染色体,为了将其中一个或几个基因定位在染色体上,在检验这些细胞系时,把某一标记基因的存在或不在与每一细胞中人的某一染色体的在或不在联系起来,从而推断某一基因是在某号染色体上。 杂 种 细 胞 系 A B C D E 人体基因 1 + - - + - 2 - + - + - 3 + - - + - 4 + + + - - 人体染色体 1 - + - + - 2 + - - + - 3 - - - + + 问题:如何用遗传学方法(不是分子生物学方法)将基因定位到染色体上,请从人类和果蝇中各举一例予以说明。 Maps of the human chromosome 1 and the X chromosome 第四节 染色体遗传机制在理论上和实践上的意义 首先,基因是在染色体上的。基因随着染色体的分离而分离。 其次,有减数分裂,才有分离现象,没有减数分裂,就没有分离现象。只有进行有性生殖的生物,才有减数分裂,才出现分离现象。 第三,基因在染色体上直线排列。如基因间的距离比较远,重组和分开比较容易,育种工作容易取得成绩。 最后,基因位于染色体上时,每一座位上的基因只要两份就可保证基因的正确分离和组合。 第五节 连锁遗传规律的应用 理论上: ① 把基因定位于染色体上,即基因的载体染色体; ② 明确各染色体上基因的位置和距离; ③ 说明一些结果不能独立分配的原因,发展了孟德尔定律;使性状遗传规律更为完善。 实践上: ① 可利用连锁性状作为间接选择的依据,提高选择结果:例如大麦抗秆锈病基因与抗散黑穗病基因紧密连锁,可同时改良。 ② 设法打破基因连锁: 如辐射、化学诱变、远缘杂交,…… ③ 可以

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