分子营养学——DNA甲基化与癌症教程方案.ppt

DNA甲基化——基本概念 在哺乳动物,DNA甲基化主要发生在5’-CpG-3’的C上.生成5-甲基胞嘧啶(5mC) CpG岛 什么是CpG？ 在基因组的一些特定区域，含有大量相联的胞嘧啶、鸟嘌呤，以及使两者相连的磷酸酯键。生物学上称这个区域为CpG岛（CpG island）。 在整个基因组中，CpG岛通常位于基因的启动子区域(promoter region)，在正常情况下，CpG岛是以非甲基化形式存在于基因的启动子内。 DNA的高甲基化与低甲基化 与正常细胞基因组相比肿瘤细胞基因组呈现出整体甲基化水平降低和特定位点基因启动子的甲基化水平升高的趋势。 高甲基化：基因的沉默 低甲基化：基因的激活 DNA的高甲基化与低甲基化 DNA的高甲基化与低甲基化 肿瘤DNA甲基化的变化表现在基因组总体甲基化水平的降低和某一些基因启动子区域CpG岛甲基化水平的升高： 基因组总体甲基化水平的降低→原癌基因和反转录转座子活化→染色体稳定性下降 抑癌基因和DNA修复基因的甲基化→抑癌基因沉默和修复基因失活→对于肿瘤的抑制作用丧失，基因损伤增加 DNA的高甲基化的抑制机理 抑癌基因的高甲基化 DNA的高甲基化 启动子CpG岛甲基化抑制基因的转录通过以下途径： 1) DNA甲基化阻止转录因子与其识别位点的结合； 2) DNA甲基化使其更易与转录抑制蛋白结合，使该基因转录失活； 3)甲基化的CpG岛使其招募组蛋白脱乙酰酶(HDAC)家族成员而改变染色体状态，从而影响基因转录。 逃避细胞死亡 BNIP3，是一个凋亡相关因子，它定位于线粒体，可以诱导细胞在缺氧情况下发生凋亡: 对生长抑制信号不敏感: p16基因：直接参与细胞周期的调控，负调节细胞增殖及分裂 抑癌基因的高甲基化 DNA低甲基化与癌症 DNA低甲基化 增加染色体的不稳定性 导致转座子的异常表达 导致原癌基因激活 增加染色体的不稳定性 转座子的异常表达 转座子（transposon，Tn）是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的一段序列。 LINE-1是人类基因组中最活跃、最丰富的可移动DNA或转座子序列。低甲基化可以引起癌基因转录激活且发生于许多肿瘤中。 LINE-1的突变性插入破坏了大肠癌和乳腺癌中抑癌基因APC和C-MYC的表达，导致肿瘤的发生。 原癌基因激活 正常细胞中，由于甲基化作用原癌基因多处于沉默状态，但在多种肿瘤细胞中，均发现原癌基因处于低甲基化状态，并且低甲基化状态与其蛋白表达升高密切相关，表明低甲基化状态可使原癌基因激活。 DNA甲基化与癌症的诊断治疗 DNA 甲基化与癌症的诊断 表观遗传学的改变是细胞癌变的重要特征之一，因此，细胞DNA 甲基化的变化可以作为癌症早期诊断的重要依据。 DNA甲基化检测稳定性好，有组织特异性，易于检测且其异常程度常与癌症的进展相关。 甲基化特异性的PCR 技术 亚硫酸氢盐处理测序 DNA甲基化与癌症治疗 利用药物来改变细胞的表观遗传学状态可能是治疗癌症的一条新途径。 目前的甲基化酶抑制剂主要有zebularine 和5-aza-2-deoxycytidine( 5-ADC)： 5-ADC 在试验中显示了对骨髓增生症、白血病和实体肿瘤都有明显的疗效 ； Zebularine是一种很有希望的口服DNMT 抑制剂，在小鼠的肠癌模型中能够明显减少息肉的数量。 DNA甲基化与癌症治疗 展望 进一步阐明肿瘤细胞特异DNA 甲基化改变的机制及与肿瘤发生发展的关系，将为最终攻克肿瘤治疗难题提供新的思路。 增加其他组织 罹患癌症风险 基因组不稳定 恢复抑癌基因 活性 DNA甲基转 移酶抑制剂 GpC去甲基化 Add Your Company Slogan Logo Logo 如图1左所示，在正常细胞中，位于抑癌基因启动子区域的CpG岛处于低水平或未甲基化状态，此时抑癌基因处于正常的开放状态，抑癌基因不断表达抑制肿瘤的发生。而在肿瘤细胞中，该区域的CpG岛被高度甲基化，染色质构象发生改变，抑癌基因的表达被关闭，从而导致细胞进入细胞周期，凋亡丧失，DNA修复缺陷，血管生成以及细胞粘附功能缺失等，最终导致肿瘤发生。同样，如图1右所示，对于在正常细胞中处于高度甲基化的一些基因和重复序列，如果其甲基化水平降低，这些基因将表达和重复序列将激活，从而导致基因印记丢失，细胞过度增长，不合适的细胞特异性表达，基因组脆性增加，以及内寄生序列(endoparasitic sequence)的激活，最终也导致肿瘤发生。 A：启动子CpG岛未被甲基化，乙酰化的组蛋白与该区域的DNA组装成松散的常染色质，这些区域染色质的构型及组蛋白的乙酰化状态能够促进启动子转录复合物的