2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1.pptVIP

第一节 蛋白质的提取和分离 丁犊丢继吟设住绕塑骤晨辨玻垃展百自浚恨婆贤剩径赁园滓头蓄灼涵顺馁2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 课程标准 1．尝试蛋白质的提取和分离。 2．以动物血清为材料，提取其中的乳糖脱氢酶并分离其 同工酶。 课标解读 1．简述蛋白质提取和分离的基本方法和基本原理。 2．尝试血清蛋白等的提取和电泳分离。 预纹茸耽仓鬃漱筐晴戈禾益显别郎素芝稻楼绷秉帽撼洱鼻霹板绞罚颧偶容2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离，就可以得到_________、甚至是________的蛋白质。目前常用的蛋白质分离提纯技术，包括_____技术、_____技术和_____技术等。其中，_____技术最为快捷灵敏、简便易行。 提取和分离蛋白质的方法原理 1．提取和分离蛋白质的方法 高纯度的 单一种类 离心 层析 电泳 电泳 遗邵咬坑恬位纵秘捆玄予歉题等龙墟攫惑埔贷啊府枝滦疲释蜜潍衅员拯磋2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 (1)概念 蛋白质含有游离的_____和_____ ，是_____电解质，在一定___条件下带有电荷，在电场中可以向与其自身所带电荷_____的电极方向移动，这就是电泳现象。 (2)原理 蛋白质所带的电荷数_____ ，移动_____ ；电荷数相同时，相对分子质量_____ ，移动_____ 。 (3)结果 不同蛋白质的混合溶液，经___________电泳后，会在_____上形成不同的_____ 。 2．电泳技术 氨基 羧基 两性 pH 相反 越多 越快 越小 越快 同一个电场 凝胶 带纹 雹窄抠斌振最攀晦观仪焕烘巢帛腮挨运锄悼代诅袍婶泼锤湛斥娩筒贝朋骸2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 洗脱法分离蛋白质利用的原理是什么？它与电泳技术的原理有何不同？ 提示　洗脱法是依据蛋白质分子质量大小，利用凝胶色谱柱使大分子蛋白质优先洗脱出来，而小分子蛋白质后分离出来，称为凝胶色谱法。而电泳法技术则是依据各种分子带电性质的差异，以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现在电场中将各种分子分离。 [思维激活1] 漾蜘娇碰镍老休闯肉泵搬沾峙根祸阔乓厢晕半停斜积元仇秋阳桩伴贷醋韶2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 (1)蛋白质的性质 蛋白质含有游离的氨基和羧基，是两性电解质，在一定pH条件下带有电荷。 (2)电泳现象 作为带电粒子，蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，这就是电泳现象。 (3)电泳原理 蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，相对分子质量越小，则移动越快。 1．电泳技术分离蛋白质的原理 木蘸胰滑烁牲予札陋疑甲恨跑十睛水慷墅陛灌仆敦孩桓循芒统圾奔头彤污2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 (1)聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为载体的一种区带电泳。该凝胶由丙烯酰胺(Acr)和交联剂N，N′—甲基双丙烯聚酰胺(Bis)聚合而成。Acr和Bis单独存在或混合在一起时是稳定的，且具有神经毒性，操作时应戴手套，避免接触皮肤，但在具有自由基团体系时就能聚合。引发自由基团的方法有化学法和光化学法两种。采用不同浓度的Acr、Bis、Ap、TEMED使之聚合，产生不同孔径的凝胶。因此，可按分离物质的大小、形状来选择凝胶浓度。 (2)电泳结果 2．聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果及其鉴定 莆寝贷诊冶茵类垦救环七莱斟真轧杖逃遍鳞掉忿嫡缴穆缘涌蜒滨撑棠贝镇2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 不同的蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹。每一种带纹可能就是一种蛋白质。 (3)结果鉴定 将带纹一个一个地剪下来，分别予以洗脱，然后对洗脱液中蛋白质做进一步的分离。如果不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质；如果还能再分离，则这个带纹中含有多种蛋白质，需要作进一步分离，直至提纯。 顾呆售冲呵谗鸟已钢厌促拼铆衰澡尹突简价毯弹彩颅镜牟短痉屋遇酪栅行2013-2014学年高中生物 6.1 蛋白质的提取和分离课件 中图版选修1 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷________方向的电极移动 (　　)。 A．相同 B．相反 C．相对 D．相向 解析　在一定pH作用下，生物大分子中有某些可解离的基团，这些基团会带上正电荷或负电荷，在电场作用