凝胶过滤和亲和层析概述.pptVIP

2）、有实际应用价值的基质 (1)纤维素 (2)交联葡聚糖 (3)琼脂糖 (4)交联琼脂糖 2、间隔臂 配位体直接和基质骨架偶联，它与互补蛋白质的相互作用将受到空间阻碍的影响。配位体必须远离网络骨架。一般是将配位体与基质骨架间加入一段长链，称为间隔臂。 1）、间隔臂的长度 一般认为，为了互补大分子获得最佳相互作用，配位体与骨架间必须插入至少4到6个亚甲基的臂。然而，当互补大分子的分子量低或与配位体亲和性高，则间隔臂长度不像大蛋白质分子或低亲和系统中那样严格。 目前还有采用长链间隔分子的,如聚赖氨酰丙氨酸，分子量约260,000，纯化作用较短链强。 2）、间隔臂的性质 惰性间隔分子：原认为脂肪族碳氢化合物是惰性的，但是实验证明存在空间干扰和非特异吸附。 亲水性间隔分子：在长轴方向引入极性基团，如二级胺、羟基、肽能极大降低非特异性吸附作用，但亲和层析结果不好。 疏水性间隔分子： 甘氨酸倍半肽（亲水）对肝葡糖激酶吸附差 6-氨基乙酸（疏水）对肝葡糖激酶吸附好 3、配位体 配位体对欲纯化的溶质有特异的亲和性. 1）、大分子与配位体的亲和力 配位体与互补大分子间