PI3K抑制剂对HGF促人结肠癌细胞SW620的增殖与迁移行为的影响.pdfVIP

行为的影响 前言?·········??······OO O O OO O O D O O O O O O···“?一”········一”””””一?“”·8习lJ舌”“””一” ”“”“‘ ”“?””一””””“””“ ?”“萏 材料与方法????????????????????????9 结果??·??··?······???······OO O O OO·················?一··OOO O O O“·14 附图???000 0 0 0 O OI O O O?O O O O OO????????????????16 附表????????OO O O O O O O O O Q O?????????OOO OO O???22 讨论··········································??····················?·?···25 结论··一“”一””“””一“一一”“一””一””一”“．．???”““””一”“·28 参考文献????????????????????????28 综述关于P13K／AKT信号通路机制与肿瘤关系的研究进展?????32 致谢························?····················??················B O O BO O·········43 。个人简历???O O O O O O?????????????????????44 中文摘要 P13K抑制剂对HGF促人结肠癌细胞 SW620的增殖和迁移行为的影响 摘 要 恶性肿瘤严重危害着人类身体健康。因此，寻找治疗肿瘤的有效方法 是目前研究的热点和难点。在我国，随着人们生活水平的不断提高， 结 直肠癌的发病率有逐年上升的趋势。目前临床上主要采用以手术为主、化 疗和放疗为辅的综合治疗手段，但效果并不理想，因此，仍需探索更加有 效的新疗法。细胞内信号传导通路参与调节细胞凋亡、增生、分化和代谢 等一系列生理活动。研究发现肿瘤的增殖、抗凋亡、转移等生物学行为与 细胞信号通路异常有关。因此，能否在这一方面寻求一条新的治疗肿瘤的 出路是很有前景和挑战性的课题。 肝细胞生长因子(Hepatocyte Grouth Factor，HGF_)是一种由多种细胞 分泌的多肽生长因子，具有强促分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵 袭以及诱导血管生成等作用。有研究表明，在结直癌患者中与正常组相比 较，血清中HGF含量显著升高，且分期越晚，HGF值越高，而其中合并 肝转移的结直癌患者较之无转移的结直癌患者，HGF值更高。因此认为 HGF参与了结直肠癌的生长、转移。HGF通过与其受体c．Met结合进而 导致包括磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases，P13K)．蛋白激 酶B(protein kinaseB， AKT／PKB)在内的多个信号通路引起一系列生物 效应，从而发挥其生理作用的。被激活的P13K可使AKT磷酸化，来调 节管理细胞代谢、生存、凋亡、分化和增殖等一系列生理活动。有研究表 明，AKT／PKB参与了多种肿瘤的发生、发展及侵袭转移。肿瘤组织中 AKT／PKB活性水平高可以是其上游调节异常造成的，所以通过抑制 HGF／c．Met介导的信号通路来抑制肿瘤生长、侵袭和转移目前正逐渐成为 肿瘤治疗研究的新方向。我们在前期研究中发现，HGF具有促进人结肠 癌细胞SW620增殖、迁移等作用，但其作用机制尚未阐明。 目前抑制HGF尼．Met介导的生物学活性方法有多种，包括：HGF的 拮抗剂、RNA干扰技术等方法，关于抑制HGF下游信号传导通路 P13队KT后是否即可抑制HGF促进结直肠癌的增殖、侵袭作用的研究 中文摘要 报道不多。 目的：探讨P13K／AKT信号通路在HGF促进结肠癌SW620细胞增殖、 侵袭中所起到的作用，以期为探求一条新的结直肠癌治疗途径提供理论依 据。 方法：1用MMT法分析检测P13K／AKT信号通路在HGF促进人结 肠癌细胞SW620增殖中的作用。 2用流式细胞术检测P13K／AKT信号通路在HGF调节人结肠癌细胞 SW620细胞周期、抗凋亡中的作用。 3用划痕实验观察P13K／AKT信号通路在HGF促进人结肠癌细胞SW620 细胞移行中的作用。 结果：l LY294002对SW620增殖的影响 应用MTT法结果显示，实验组加入LY294002作用48h，浓度 20}．tmol／L三实验组与对照组OD值比较差异有显著性(PO．05)，且这 三个浓度组间OD值比较差异有显著性(P0．05)。终浓度为10pmol／L、 5pmol／L LY294002组、DMSO组与对照组之间OD值比较差异无显著性 (P0．05)。