李琼-香料香精分析技术及进展.ppt

1，气相色谱 色谱柱是分离的关键因素之一。 作为柱子内的GC液相主要有两类： 一类为极性液相如PEG 20M ，属聚乙二醇类； 另一类为非极性液相如SE-30，一种甲基聚硅氧烷物质。 气相色谱最先是利用填充柱色谱来分离香味成分,但填充柱柱效不高，难以分析复杂的香精香料样品。现主要采用柱效更高的毛细管柱。 另外还有能耐400℃以上高温的毛细管柱出现,可用来分析更高沸点的成分。 1999年David等报道了一种快速高分辨毛细管气相色谱技术，该技术采用小内径的毛细管柱（100um）、600kPa以上的高压，大幅减少了分析时间。但该法仪器要求高，难以推广。 二维色谱（ GC+GC ） 当复杂的香精样品难以用一根色谱柱分离时，采用偶合柱系统（GC+GC）则是分离复杂香精的新方法。 1998年，Nadjoua Chanegriha等采用“极性偶合柱系统”，考察了一种复杂精油在几种不同构造的柱体系上的分离情况。结果表明：在其中构造最好的一组偶合柱上，所有19种成分都得到很好分离。 GC+GC一般采用中心切割法，从第1支色谱柱预分离后的部分馏分，被再次进样到第2支色谱柱作进一步的分离；而样品中的其他组分或被放空或也被中心切割。 尽管可通过增加中心切割的次数来实现对感兴趣组分的分离，但由于组分流出第1支柱进到第2支柱时，其谱带已较宽，因此第二维的分辨率会受到损失 这种方法的第二维分析速度一般较慢，不能完全利用二维气相色谱的峰容量．它只是把第1支色谱柱流出的部分馏分转移到第2支色谱柱上，进行进一步的分离。 全二维气相色谱技术（GC×GC） 全二维气相色谱技术（GC×GC）是多维色谱的一种，但又不同于通常的二维色谱，它提供了一个真正的正交分离系统。 全二维气相色谱具有分辨率高、峰容量大、灵敏度高、分析时间短、定性可靠性强等特点，因而能在复杂样品体系的分析中发挥更重要的作用。 全二维气相色谱色谱柱的连接 全二维色谱(GC×GC) 全二维气相色谱(GC×GC）是把分离机理不同而又互相独立的两支色谱柱以串联方式结合成二维气相色谱 在这两支色谱柱之间装有一个调制器，这个调制器起捕集再传送的作用。 经第1支色谱柱分离后的每一个馏分，都需先进入调制器，进行聚焦后再以脉冲方式送到第2支色谱柱中进行进一步的分离。 所有组分从第2支色谱柱进人检测器信号经数据处理系统处理后，得到以第1支柱上的保留时间为第一横坐标，第2支柱上的保留时间为第二横坐标，信号强度为纵坐标的三维色谱图，或二维轮廓图。 全二维气相色谱图 P Marriott,等人运用GC×GC对香根草油进行分析，分离出144种成分，而这在单一色谱柱是无法分离的。 R Shellie成功的运用GC×GC完成茶树油对映异构体的分离分析。首先用第一根柱将对映异构体与其它组分分离，第二根柱分离对映异构体。 香精香料中不挥发性组分的分析 柱色谱法 薄层色谱法（TLC） 高效液相色谱法 2.柱色谱法 湿法填柱，用溶剂洗脱，得到不同的馏分或组分，接下来再进行分析鉴定。例如，硅胶柱，乙醚在戊烷中含量逐渐增加，进行分级洗脱，可以分段地分离各类成分。 干柱色谱法，样品组分经溶剂洗脱分离后，将柱填料移出按吸附层切割成段并用极性溶剂萃取。 3.?薄层色谱法（TLC） 薄层色谱法是快速、便宜及简单的技术，作为筛选工具特别有价值。 一般制法及分析用途。 4.高性能液相色谱法（HPLC） 对于分析分子量较大的物质、许多天然提取物中挥发性小的组分及热不稳定的物质，气相色谱是无能为力的，而HPLC却特别有效。HPLC具有定量、快速自动化等多方优点。但由于液体黏度大，分离速度较慢。 三、鉴定方法 质谱法 多维检测器 其它分析方法 质谱作为检测器与色谱技术联用使香精香料成分的研究的效率得到了大幅度提高。 通过GC／MS联用在谱库检索就能给出化合物的可能结构信息， 一个复杂的混合物在较短时间内就可以得到分离鉴定。 GC／MS是当前香精香料分析中应用最多的方法。 1.质谱 茉莉精油色谱图 尽管GC/MS可以分析鉴定许多香料香精中的成分，但对于复杂样品也常常需要进行分组分析，或需在在两个有不同固定相的柱子上进行分离，因此GC/MS 技术也存在一定的局限性。 MS／MS的问世为复杂的香料香精定性定量提供了新途径， MS／M S可以将色谱上不能分开的共流物利用多通道检测将其完全分开。 液相色谱—质谱联用方法 对于香料香精中难挥发组分的分离分析可采用液相色谱-质谱联用（LC/MS）技术。 LC/MS与GC/MS技术应用比较 如上图可见LC/MS把研究物质分子量的范围大大的扩展了。两者特点为： （a）LC/MS更适于非挥发高分子量物质的分析鉴定，GC/MS更适用于挥发性、低分子量的物质分析鉴定。 （b）LC/