家禽和其暴露人群甲型流感病毒感染的流行病学调查研究.pdf

缩略语 万方数据 缩略语 万方数据 摘要 家禽及其暴露人群甲型流感病毒感染的流行病学调查研究 捅 要 influenza 人感染禽流感病毒 avian viruses，AIVs 的事件近年来报道愈加频 繁。自从禽流感病毒H5N1于1997年被报道能够感染并致人死亡以来，已在15 个国家造成658人感染，病死率近60％；禽流感病毒H7N7也于2003年在荷兰 引起1人死亡；其他禽流感病毒如H9N2、H7N3等感染人事件在香港、加拿大 等地也有报道。2013年初，禽流感病毒H7N9人感染病例又在我国东南部出现， 间AIVs感染及人群AIVs感染状况是备受关注的科学问题。 进行H7N9禽流感病毒的现场调查，检测方法是关键一环。为了选择能够应 用于现场H7N9禽流感病毒的快速、高效的检测方法，我们对5种用于检测人甲 型流感感染的商品化试剂盒 Life VetMAXTM—GoldSIVDetection Technologies MolecularInfluenzaA手B FluAB Kit，Quidel assay、RemelXpect assay，Quidel influenza SofiaInfluenzaA+B Quickvue assay以及Quidel assay 进行了评价。首 先从江苏省无锡市和南京市采集的健康活禽肛拭子样本提取RNA，用世界卫生 Health 组织 World A PCR，qRT-PCR influenzaassay和H7N9assay进行甲型流感病毒和禽流感病 然后对这97个标本使用上述5种试剂盒进行盲法检测以及WHO H7N9 qRT-PCR assay的复核。检测时，根据试剂盒的不同试验原理，核酸分子检测方法每种重 复3次，抗原检测方法每种重复2次。最后以WHO H7N9 qRT-PCRassay作金标 准，计算这几种方法的敏感度和特异度及其可信区间 confidenceinterval，C1 。 结果： 1 WHO H7N9 qRT-PCRassay第一轮和第二轮结果有很好的一致性。 2 influenza QuidelQuickvue assay对97份标本检测结果全部显示阴性。其他四种 试验方法均有很好的特异度 96．100％ 。 3 LifeVetMAXTM．Gold Technologies SIVDetection a MolecularInfluenzaA+B 1．12％ 。Quidel assay敏感度较高，达85％ 95％CI 66．96％ ，假阳性率3％ 95％C10．10％ 。 为掌握AIVs在无锡地区家禽中的感染状况及其遗传进化特征，我们于2013 年7月．12月每月在无锡市活禽交易市场和家禽养殖场的家禽中采集活禽及其相 关环境拭子标本，以拭子标本提取的RNA为模板，运用WHO influenza qRT-PCR Aassay对样品进行甲型流感病毒筛查，对筛查阳性标本采用一步法反转录PCR 进行流感病毒全基因组PCR扩增以及基因克隆和测序。测序所得的序列进行系 1 万方数据 摘要 统发育分析，同时对甲型流感病毒阳性标本进行MDCK细胞及鸡胚分离培养和 鉴定。结果： 1 共采集标本305份，甲型流感病毒阳性率为28．5％ 87／305 。 家禽交易市场样本甲型流感病毒阳性率高于养殖场 31．9％VS．10．4％，z2 9．16， H11N2 1个 和H5N1 1个 。系统发育分析表明H5N8和H11N2有不同程度 1 1 A／Chicken／2／Wuxi／20 3 H9N2 和A／Chicken／1／Wuxi／203 H5N1 。 禽间AlVs感染情况复杂多样，而禽类饲养、加工等职业暴露人群是感染 AIVs的高危人群。除了感染AlVs发病甚至死亡之外，他们当中还存在诸如H5、 H7、H9、H11等亚型AlVs的隐性感染者。猪能够感染猪流感病毒 swineinfluenza virus，SⅣ ，也能感染多种禽源和人源流感病毒，在“禽．猪．人”的种间传播链中 扮演着流感病毒中间宿主及多重宿主的作用。研究已证明猪可感染禽流感病毒 H5N1和H9N2。广东、福建、浙江地区约1％的猪职业暴露人群中有H9N2感染。 因此，为了解禽和猪职业暴露人群甲型流感病毒的感染状况，通过分析感染与一 般人口社会学情况和流行病学特征的关系，确定感染AlVs的危险因素，为人感 染AlVs的防治策略提供依据，我们在无锡地区禽 猪 养殖场、屠宰场、市场 和散养户集中地的暴露人群中开展了甲型流感病毒血清学现况调查。选择了禽职 业暴露人群498名，猪职业暴露人群608名和无职业暴露的对照人群165名，共 inhibition，HI 试验和微量中 1271名研究对象。通过血凝抑制 hemaggluti