多管发酵法测定珠江水的总大肠菌群数.docVIP

多管发酵法测定珠江水中的总大肠杆菌群数 1 实验目的 综合应用微生物学基本原理和基本实验技术，独立完成培养基的制备与灭菌操作及微生物的分离、观察、描述，掌握多管发酵法测定珠江水的总大肠杆菌群数的实验方法与技术。 2 实验材料 2.1 实验仪器 超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、显微镜、天平等。 培养基：乳糖蛋白胨培养液（分装于10支25ml试管中，内含倒置德汉氏小倒管）、伊红—美蓝（EMB）培养基。 2.2 染色剂 结晶紫液、碘液、95%乙醇、番红溶液 2.3 水样 珠江水样 2.4 其他 报纸、橡皮筋、棉塞、标签纸、无菌水、10.0ml移液管、吸耳球、250ml和100ml锥形瓶、移液枪、培养皿、载玻片、油性笔、接种环、酒精灯、香柏油等 3 实验步骤 3.1 初发酵试验 3.1.1 乳糖蛋白胨培养液的配制与灭菌 将2.76g乳糖蛋白胨粉末溶解于装有120mL蒸馏水的锥形瓶中，充分混匀，然后分装于10支试管中，每支试管装10ml培养液，再用镊子夹取德汉氏小套管，并用小滴管灌满培养液后倒置放入试管中，塞上棉塞，并用报纸包扎好，于121℃高压灭菌器中灭菌15min，待冷却后使用。 3.1.2 灭菌水的制备 用100ml锥形瓶装80ml自来水，塞上棉塞并用报纸包扎好，于121℃高压灭菌器中灭菌15min，待冷却后使用。 3.1.3 实验器皿的包