优质公开课动物细胞工程第一课时分析.ppt

 动物细胞工程 (基础) 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞工程 一、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 （三）、过程 幼龄动物 剪碎组织 原代细胞培养 取动物器官 和组织 细胞悬浮液 传代细胞培养 胰蛋白酶处理 单个细胞 胰蛋白酶处理 单个细胞 归纳 过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代 培养(分装前) 1-10代细胞 遗传物质 改变 原代细胞 培养 加 液 40—50代细胞) 未 遗传物质 改变 无限传代 已 传代培养 胰蛋白 酶 1、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。 2、细胞膜的主要成份是什么？ 蛋白质和磷脂 3、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 4、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 5、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 1、无菌、无毒的环境 保证细胞顺利的生长增殖 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 （四）、动物细胞培养的条件 2、营养 3、温度和PH 培养室中控制,使之达到 36.5 ± 0.5℃, 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1、试着列举你所知道的克隆动物。克隆动物的方法与植物组织培养一样吗？ 2、请简述多利克隆的过程？ 卵母细胞 苏格兰黑面母羊 芬兰白面母羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 另一头母绵羊子宫 胚胎移植 多利羊 多利羊的培育过程 重组细胞 动物体细胞核移植技术和克隆动物 体细胞核移植的过程（以克隆高产奶牛为例） : 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 受体细胞：MⅡ期的卵母细胞 请同学们归纳动物体细胞核移植概念 （依核源） 1.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞保持一般保持正常二倍体的核型，未突变. 2.细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞. 体细胞核移植技术的应用前景 1）改良动物品种 2）保护濒危动物 3）克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 4）异种移植的供体，用于组织器官的移植 5）深入了解胚胎发育及衰老过程 6）追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 体细胞核移植技术存在的问题 成功率非常低 绝大多数克隆动物存在健康问题 对克隆动物食品的安全性问题也存在争议 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （　 ）　　 A．获得不死性的细胞 B．10代以内细胞 C．原代细胞 D．传代细胞 1、动物细胞工程技术的基础是 （ 　）　 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体　 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 课堂反馈练习 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ） A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中 D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变 B 4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③培养基需要加入血清 ④温度与动物体温相似 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥CO2能调节培养液PH A、①②③④⑤⑥ B、 ①②③④ C、①③④⑤⑥ D、 ①②③④⑥ D 5、动物细胞培养的特点 （ ） ①细胞贴壁 ②有丝分裂 ③细胞分化 ④接触抑制