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研究课题开题报告 北京师范大学高等教育与管理博士研究生班吕琢 2015.2.24 植物根中具有发芽抑制功能的 他感化合物探索 北京大学附属中学高一·一班 曲芳菲 2004年11月30日 选题背景及研究意义： 发现、创制和应用天然除草剂对于维护生态 平衡、保护环境等具有重大意义。 近年来，由于化学除草剂的大量使用，导致 生态平衡破坏和环境污染日益加剧。 自然条件下，植物间的光、水、营养等存在着 激烈竞争。某些植物通过向环境中释放某些化 合物影响周围其它植物的生长和发育（他感作 用）。具有他感作用的物质称为他感化合物。 观察发现在豚草和野艾群落中，很少混有其它 杂草。预示着这两种植物的根部可能含有并释 放出具有抑制其它杂草种子发芽作用的他感化 合物。 研究目的： 1. 寻找植物根中所含的具有抑制种子发芽功能的他感化合物。 2. 评价这些他感化合物对种子发芽和幼根生长抑制作用的强弱。 3. 探索他感化合物的适宜使用浓度。 研究的技术路线: 1. 提取植物根中具有抑制种子发芽功能的他感化合物。 2. 观察萝卜籽和燕麦种子在浸有上述他感化合物滤纸上 的发芽状况，测量根长。 3. 考察植物根中所含他感化合物对种子发芽和幼根生长 抑制作用的有无及其作用强度。 实验材料： 以豚草和野艾根为试验材料，寻找他感化合物。 豚草 野艾 以萝卜籽和燕麦种子为受体材料，鉴定他感化 合物对种子发芽和幼根生长抑制作用的有无及 作用强度。 研究方法： 3. 将蒸发干燥后的根部提取物用蒸馏水溶解后(1g/ml )，加入 等量的醋酸乙酯有机溶剂，用分液漏斗进行萃取分离。经 无水Na2SO4脱水后，在真空干燥器中进行减压浓缩、干燥。 样品洗净、磨碎后，在5 ℃黑暗条件下用甲醇浸泡2天， 提取可能存在的他感化合物。 2. 将上述提取液过滤后，在真空干燥器中进行减压浓缩、干燥。 他感化合物提取： 根部提取物原液 HCl (0.5M)， 调至pH3.0 乙酸乙酯 水层 乙酸乙酯层 NaHCO3 (0.5M) 乙酸乙酯层 NaHCO3 层 NaOH (0.5M) 乙醚 乙醚层 （酸性部分） 乙酸乙酯层 HCl (0.5M)， 调至pH3.0 乙醚 乙醚层 (酚溶部分) HCl洗净 乙酸乙酯层 (中性部分) 无水Na2SO4脱水 真空干燥 NaOH 层 真空干燥 HCl (0.5M)，调至pH3.0 真空干燥 无水Na2SO4脱水 无水Na2SO4脱水 H2O洗净 发根实验： 直接发根试验： 将浸有蒸馏水的滤纸放到培养皿中，将切成1cm长豚草和 野艾根摆放在滤纸上，然后每皿分别播种50粒萝卜籽或燕 麦种子。20 ℃黑暗条件下发芽。设置空白对照。 将根洗净后，1g根加10ml纯水磨碎制成水提取物原液。 将原液分别稀释成10倍和100倍。 取5ml上述各种浓度的提取液浸湿滤纸，按上述方法和条件 令萝卜籽和燕麦种子发芽。 水提取物发根试验： 甲醇提取物原液发芽试验： 将根部甲醇提取物用纯水溶解成1g/ml和1g/10ml浓度。 按上述方法和条件进行萝卜籽和燕麦种子发芽试验。 有机溶剂分离后提取物发芽试验： 将前述经过各种分离方法所获得的根部提取物用纯水 溶解成1g/ml和1g/10ml浓度。按上述方法和条件进行 萝卜籽和燕麦种子发芽试验。 他感化合物的发芽抑制作用调查： 1. 每天测量幼根长度，计算50条根的平均长度。 2. 通过与空白对照对比，确定各种根部提取物的 发芽抑制作用的有无。 3. 对比不同浓度的根部提取物上的发芽种子数量 和生长状况鉴定各种根部提取物的发芽抑制作 用的强弱。 预期成果： 1. 2. 3. 研究成果表达形式： 以文字形式写出研究报告。 致谢: 感谢教育部、北京大学附属中学、北师大及北 师大附属中学提供这种创新研究机会。 期待着各位博导老师的指导和博士同学们的帮助，先致谢忱。 参考文献: 孔垂华 徐效华（2003）有机物的分离与结构鉴定， 化学工业出版社 肖进中（1998）植物的他感作用与农业生产， 《生物学教学》1998年第11期