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专题四 现代生物科技 知识内容 要求 4-1遗传工程 1.基因工程的诞生 2.基因工程的原理及技术 3.基因工程的应用 4.蛋白质工程 Ⅰ Ⅱ Ⅱ Ⅰ 4-2克隆技术 1.植物的组织培养 2.动物的细胞培养与体细胞克隆 3.细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ Ⅰ Ⅱ 4-3胚胎工程 1.动物胚胎发育的基本过程与简述胚胎工程理论基础 2.胚胎干细胞的移植 3.胚胎工程的应用 Ⅰ Ⅰ Ⅱ 4-4生物技术 的安全性和 伦理问题 1.转基因生物的安全性 2.生物武器对人类的威胁 3.生物技术中的伦理问题 Ⅰ Ⅰ Ⅰ 考点1  基因工程与蛋白质工程 抗虫鉴定、抗病鉴定 活性鉴定等 ①是否导入 ②是否转录 是否翻译 ? 1．基因工程的基本工具的比较 限制酶 DNA连接酶 载体 作用 切割目的基因和载体 拼接DNA片段，形成重组DNA 携带目的基因进入受体细胞 作用 部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 作用 特点 (条件) (1)识别特定的核苷酸序列 (2)在特定位点上切割 (1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端 (2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端 (1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 (2)有多个限制酶切割位点 (3)具有特殊的标记基因 常用 类型 EcoRⅠ限制酶 SmaⅠ限制酶 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 2.将目的基因导入受体细胞中的方法的比较 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射法 Ca2＋处理法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化过程 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA→表达 目的基因表达载体提纯提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 3.PCR技术与DNA复制的比较 DNA复制 PCR技术 区别 场所 细胞内(主要在细胞核内) 细胞外(主要在PCR扩增仪内) 酶 DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等 耐热的DNA聚合酶(Taq酶) 温度条件 细胞内温和条件 需控制温度，在较高温度下进行 合成的对象 DNA分子 DNA片段或基因 联系 ①模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 ②原料：均为四种脱氧核苷酸(即dCTP、dATP、dGTP和dTTP) ③酶：均需要DNA聚合酶进行催化 ④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 4.目的基因的检测内容和方法的比较 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子水平 检测 第一步 目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上 DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间) 是否成功显示出杂交带　 第二步 目的基因是否转录出mRNA 核酸分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 同上 第三步 目的基因是否翻译出蛋白质 蛋白质分子杂交(抗原—抗体之间) 同上 个体水平 鉴定 包括抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性程度；基因工程产品与天然产品进行活性比较，以确定功能是否相同等 5.两种基因治疗途径及其特点 途径 方法 特点 不同点 体外基因 治疗 从患者体内获得某种、细胞扩增→输入体内 操作复杂，但效果较为可靠 体内基因治疗 直接向患者体内组织中转移基因 方法简便，但效果难以控制 相同点 都属于基因治疗，都是将正常的外源基因导入靶细胞，以代替、修复、纠正缺陷基因。目前两种方法都处于临床实验阶段 6.基因工程的应用 表现方面 具体内容 植物基因工程 ①抗虫转基因植物 ②抗病转基因植物 ③抗逆转基因植物 ④利用转基因改良植物品质 动物基因工程 ①提高动物生长速度 ②用转基因动物生产药物(如乳腺生物反应器) ③用转基因动物作器官移植的供体 ④用于改善畜产品的品质 基因工程药物 控制药品合成的相应基因 基因治疗 ①体外基因治疗 ②体内基因治疗 7.基因工程与蛋白质工程的比较 项目 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 设计预期的蛋白质结构→设计预期的蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现 1．对DNA连接酶、DNA聚合酶等的理解 名称 作用 参与的生理过程 及应用 DNA连接酶 连接两