第三章 第二节 胚胎工程.ppt

体外受精 胚胎体外培养 胚胎移植 胚胎分割 胚胎干细胞培养 早先时候的成功例子： 1、1890年，世界首例胚胎移植例子，安哥拉兔的胚胎移植。 2、1982年世界第一胎试管牛犊问世。 体外受精 1、概念： 采用雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子，使其在试管中受精。 2、过程： （1）精子的收集和获能； （2）卵母细胞的收集和培养； （3）获能精子和卵细胞的受精； 卵母细胞的收集和培养 获能精子和卵细胞的受精 胚胎体外培养 概念：将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。 培养液：（不同时期成分不同） 水、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 胚胎培养比组织、细胞培养要难。 目前只能进行少数几种动物的不同阶段的胚胎培养，还无从受精卵到新生儿的全体外培养技术。 胚胎移植 1.概念： 将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜，经过激素处理，使其超数排卵后受精，然后将发育的早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。也称“借腹怀胎” 供体：提供胚胎的个体。 受体：接受胚胎的个体。 为什么胚胎移植能成功? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? 同种动物发情排卵后,在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境。 为什么能收集到胚胎? 早期胚胎一定时间内处于游离状态。 供体和受体会不会发生排斥？ 同种动物之间基本上不排斥。 移植的胚胎能否保留供体双亲的特性? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但其遗传特性不受受体的影响。 胚胎分割 1.概念: 问题探讨： 1、分割什么时期的胚胎? 2、用什么仪器来分割? 3、胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液； 分割胚胎（机械法、酶处理）； 移植胚胎给受体； 着床产仔。 我国胚胎分割的成果 胚胎干细胞 1.概念：（ES细胞），是由早期胚胎（囊胚）的内细胞团分离出来的一类细胞。 2.特点: 1)形态：体积小、细胞核大、核仁明显. 2)功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。 3)体外培养ES细胞可以增殖而不分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。 胚胎干细胞的培养 培养关键： 需要一种能促进胚胎干细胞的生长，但抑制其分化的一种培养体系。 培养过程： 1、制备饲养层（胚胎成纤维细胞）； 2、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层； 3、酶消化或机械剥离内细胞团； 4、分为单个细胞。 5、加饲养层培养。 胚胎干细胞核移植 概念： 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 过程： 细胞核移植；胚胎培养；胚胎移植。 胚胎干细胞的主要用途： (1)基因敲除，研究基因功能 (2)培育出人造组织器官，用于器官移植 (3)改良创造动物新品种。 胚胎干细胞的应用前景 * 胚 胎 工 程 胚胎工程： 研究的重要内容： （技术手段） 研究的对象： 高等脊椎动物，特别是哺乳动物 概 念： 泛指在动物胚胎发育过程中所进行的各种技术操作。 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 对不同动物,采取卵母细胞的方法不同 ①从活体卵巢中采集卵母细胞(超数排卵) ②从屠宰后母畜卵巢上采集卵母细胞 超数排卵：是指将供体雌 性动物经激素(促性腺激素) 处理，使其发情，并能排出数量较多的发育成熟的卵子。 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 胚 胎 工 程 良种雌性动物。 同种的、生理状态相同的其他雌性动物。 胚 胎 工 程 来源：雌性动物的早期胚胎或体外受精及动物核移植等其他方式得到的早期胚胎。 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理*…… 超数排卵* 供体公牛 配种 取出早期胚胎 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 2、胚胎移植的过程： 未配种 同期发情技术：主要是借助外源激素刺激卵巢，使其按照预定的要求发生变化，使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段，从而达到同期发情。 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 2.优势: 指借助显微操作技术将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母子宫，产生同卵多仔后代的技术。 后代具有相同的遗传物质，属于克隆。 可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。 3.特点: 胚 胎 工 程 1、发育良好的，形态正常的早期胚胎（囊胚及之前） 2、实体显微镜和显微操作仪； 切割刀、切割针 胚 胎 工 程 提示： 内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚