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实验七_果蝇的三点测验
实验七 果蝇的三点测验 湖州师范学院 生命科学学院生物系 一、实验目的: 1、掌握三点测交的原理及方法; 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法; 3、了解绘制遗传学图的原理和方法。 二、实验材料: 五、实验步骤: 1、选处女蝇:正交选野生型为母本,三隐性雄蝇为父本。 反交选三隐性雌蝇为母本,野生型为父本,将母本旧 瓶中的果蝇全部麻醉处死,在8-12h内收集处女蝇5只, 将处女蝇和5只雄蝇转移到新的杂交瓶中,贴好标签, 于25℃培养; 2、7d后,释放杂交亲本(一定要干净); 3、再过4-5天,F1成蝇出现,在处死亲本7天后,集中观 察记录F1表型及性别。 4、选取5对F1代果蝇,转入一新培养瓶,于25℃培养, 其余F1代果蝇处死; 5、7d后,处死F1亲本; 6、再过5d,F2成蝇出现,开始观察记录,连续统计7d, 观察眼色,翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。 六、实验结果: 1、将观察到的F2代各表型个体数填入书本P17表5-1中,确定基因间重组发生的情况; 2、计算基因间的重组值及双交换值; 3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交换值对位于两端的基因间距离进行校正; 4、计算并发系数和干涉值; * * 黑腹果蝇品系: 野生型果蝇(+++) 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇(wmsn3) 白眼、小翅、焦刚毛 三隐性个体为白眼(w)、小翅(m)、焦刚毛(sn3), 这三个基因都位于X染色体上。 三、实验材料及仪器设备: 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。 乙醚、酵母粉、蔗糖、丙酸、玉米粉等。 位于同一条染色体上的基因是连锁的,而同源 染色体上的基因之间会发生一定频率的交换,使子代中出现一定 数量的重组型。 重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。 而根据基因在染色体上直线排列的原理,基因交换频率的高低与 基因间的距离有一定的对应关系。 基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。 如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,直接将重组 值作为基因图距; 如果基因间相距较远,两个基因间往往发生两次以上的交换,必 须进行校正,来求出基因图距。 四、实验原理: 三点测交:以三对基因为基本单位,通过1次杂交和测交,同时确定三对基因在染色体上的位置和排列顺序。 方法:用三杂合体和三隐性个体杂交,获得三因子杂种(F1),再使F1与三隐性基因纯合体测交,通过对测交后代表现型及其数目的分析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。 通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在实验中检测到所发生的双交换。 干涉 一般用并发率表示干涉的大小。 并发率= 观察到的双交换频率 两个单交换频率的乘积 P: × F1: × m sn3 w m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m + + + sn3 w + + + m sn3 w m sn3 + + + w + + + m sn3 w m + w + sn3 + + + + m sn3 w 反 交 雌蝇X染色体上三对基因之间发生交换重组,产生8种雌配子 雄蝇产生两种配子 因为F1代雄蝇为三隐性个体,所以F1代雌雄蝇自交时,即进行测交,F2代可以得到8种表型。 要求每组至
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