实验三果蝇的形态生活史观察和雌雄鉴别及饲养.doc

实验三 果蝇的形态、生活史观察和雌雄鉴别及饲养 实验目的 了解果蝇生活史各个阶段的形态特征，掌握果蝇雌、雄成虫和几种常见突变性状的主要区别方法。 学习实验果蝇的饲养管理、实验操作、培养基的配制等方法。 掌握果蝇单因子的杂交方法和杂交结果的统计处理方法，理解分离定律的原理． 实验原理 黑腹果蝇为双翅目昆虫，具完全变态。用作实验材料的优点是：①容易饲养，生活周期短；②繁殖能力较强，每只受精的雌虫约可产卵４００～６００粒，因此在短时间内可获得较大的子代群体，有利于遗传学分析；③突变类型多，研究得较清楚的突变已达４００多个，且多数是形态特征的变异，便于观察；④唾腺染色体较大．因此，果蝇在遗传学研究中得到广泛应用，积累了许多典型材料． 材料与用品 材料 饲养的野生型和几种常见突变型果蝇。单因子杂交实验可选用黑腹果蝇的长翅纯合体、残翅纯合体作为实验材料． 用具及药品 用具 双筒解剖镜、显微镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、培养瓶、白瓷板、毛笔、棉塞、软木塞或橡胶塞、恒温培养箱、小滴瓶、载片、盖片、吸水纸、纱布等． 药品 琼脂、蔗糖、乙醇、氯仿、丙酸、玉米粉、酵母粉． 实验步骤 1果蝇生活史的观察 果蝇生活史包括受精卵、幼虫、蛹、成虫四个发育阶段． 2麻醉果蝇 ①制备麻醉瓶　　用干净培养瓶或与培养瓶口径相同的玻璃瓶并配备相应的软木塞或橡胶塞，在软木塞的下面钉一铁钉，在铁钉上缠一小团棉花．或可在软木塞上打一小孔，塞上一折叠的吸水纸．或可在橡胶塞上划一切口，夹住一折叠的吸水纸． ②引出果蝇　　　将有果蝇的培养瓶用手轻拍，使果蝇震落瓶底，迅速拔去棉塞，将麻醉瓶与培养瓶的两口相对，培养瓶在下、麻醉瓶在上并朝向灯光处，双手遮住培养瓶，利用果蝇的趋光性和向上性，将果蝇引入麻醉瓶． ③麻醉　　　在麻醉瓶瓶塞的棉球或吸水纸上滴加１～２滴乙醚或氯仿，迅速塞入麻醉瓶口，０.５～１min左右大部分果蝇即被麻醉落入瓶底，摇动麻醉瓶，全部果蝇震落瓶底，之后立即将果蝇倒在白瓷板或玻璃板上，用毛笔小心拨动观察．如果用于杂交，翅膀外展的果蝇不能使用． 3 辨认果蝇成虫雌雄个体 雌果蝇 雄果蝇 体型 腹部 第一对足 大 末端尖 背面：环纹５节、无黑斑 腹面：腹片７节 跗节基部无性能 小 末端钝 背面：环纹７节、延续到末端呈黑斑 腹面：腹片５节 跗节基部有黑色鬃毛状性梳 4果蝇常见突变类型的观察 突变名称 基因符号 性状特征 在染色体上座位 白眼 棒眼 黑檀体 黑体 黄体 残翅 焦刚毛 W B e b y vg sn3 复眼白色 复眼横条形，小眼数少 身体成乌木色，黑亮 体黑色，比黑檀体深 全身呈浅橙黄色 翅明显退化，部分残留，不能飞 刚毛卷曲如烧焦状 X1.5 X57.0 ⅢR70.7 ⅡL48.5 X0.0 ⅡR67.0 X21.0 5果蝇原种保存 为了保证果蝇杂交试验材料的充分供应，必须保存一定数量和种类的果蝇原种． 原种要纯．每次转移培养基都要严格检查有无混杂，如发现同一原种群体内有其他类型，应立即丢弃，以保证群体的纯度． 每隔２～３周换一次新鲜的培养基，每瓶４～８对，每一原种至少保留两套，并注明类型和转移日期． 平时保存可放在生化培养箱内湖哟恒温培养箱内，温度调至１５～１８0C．扩大培养和实验时将温度调至２０～２５0C，以便加快生长繁殖．夏季高温时，最好用可制冷的生化培养箱保存原种． 6果蝇培养基的配制 配方 水／ml 琼脂／g 蔗糖／g 玉米粉／g 丙酸／ml 酵母粉／g ① ② 80 100 1.5 1 13 10 10 10 5 0.5 5 0.5 配方①可用于培养杂交果蝇，因培养基较干稠，可避免黏着果蝇．配方②可用于原种保存，因培养基较稀，可延长培养时间．两种培养基也可都用苯甲酸而不用丙酸．