人教版1.1DNA重组技术的基本工具分析.ppt

你还记得我们吗？ 氢键 磷酸二酯键 DNA聚合酶 限制性内切酶 DNA连接酶 运载体 专题1.基因工程的基本内容 别名： 操作环境： 原理： 操作水平： 结果： 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” 1、简称： 2、分布： ?? 限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 限制酶的识别特点 　 4、结果： 一、限制性核酸内切酶 2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 　 三、运载体 2、需要的条件： 　⑴有1~多个限制酶切点 　⑵能在受体细胞中自我复制，或整合到受体细胞的染色体DNA上复制 　⑶有某些标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ⑷对受体细胞无害 3、常用运载体： 　 质粒、λ噬菌体的衍生物或某些动植物病毒 练习 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 基因工程常用的受体细胞有（ ） (1)大肠杆菌 （2）枯草杆菌 （3）支原体 （4）动植物细胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3） 2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? C A A T T DNA聚合酶 G A G T A T C DNA聚合酶 用途 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 作用 对象 DNA复制 基因重租 4、 DNA连接酶与DNA聚合酶比较 1、载体必须具备的条件： ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ②具有一至多个限制酶切点，以便与 外源基因连接 ③具有某些标记基因，便于进行筛选。 ④对受体细胞无害 三、基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车” 2、常用的载体： 质粒， λ噬菌体的衍生物， 动植物病毒等 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因 3、质粒 本质：小型环状DNA分子。 分布：许多细菌、 酵母菌等生物 笔记 2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 3、下列不适合用于基因工程的运载体 是（ ） A、质粒 B、噬菌体 C、细菌 D、病毒 选我 C 4、下列说法正确的是：（ ） A、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、 连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因 进行大量复制的过程可称为“克隆” 选我 D 审题 课堂练习： 3.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的 核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个 限制酶切点，以