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分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制
1、1M Tris-HCl? ?? ?? ???□组份浓度 1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)? ?□配制量 1L ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? □配制方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???pH值? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 浓HCl ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???7.4? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 约70mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???7.6? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 约60mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???8.0? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 约42mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???4. 将溶解定容至1L。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???5. 高温高压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl? ?? ? □组份浓度 1.5 M Tris-HCl ? ? (pH8.8)? ?? ?? ?? ???□配制量 1L ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?□配制方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?4. 将溶液定容至1L。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?5. 高温高压灭菌后,室温保存。 ? ?? ? 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10×TE Buffer? ?? ???□组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)??□配制量 1L ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? □配制方法 1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 500 mM EDTA(pH8.0) 20mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。 ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 4. 室温保存。 4、3 M醋酸钠? ?? ?? ? □组份浓度 3 M 醋酸钠 ? ? (pH5.2)? ?? ?? ?? ? □配制量 100mL ? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ??
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