色谱讲稿2.docVIP

(三)、正相色谱与反相色谱: 正相 反相 固定相极性 大 小 流动相极性 小 大 流出顺序 极性小的组分先流出 极性大的组分先流出 离子交换色谱: 固定相: 离子交换树脂 分离对象:离子化合物 流动相: 水溶液或缓冲液 分离机制:差速迁移 树脂分类: 具有网状立体结构的高分子聚合物。 聚合 骨架 阳离子交换反应： nRSOH + M （RSO）M + nH+ (树脂再生) (用NaOH滴定,由耗V求X%) (树脂可反复使用,用HCL浸泡,冲洗) 阴离子交换反应： R-N(CH)OH－ + CL－ R-N(CH)CL－ ＋ OH－ (用酸标液滴定OH－用可求X%) ( 阴离子树脂的再生,用适当的碱液浸泡) 、树脂的性能: 交联度: 交换树脂中,交联剂(二乙烯苯)的含量为交联度,以重量百分比表示。 交联度 网眼 交换 体积大的离子 大 小 慢 不易进入 小 大 快 大小离子均可进入 阳离子交换树脂一般交联度8 % (常用) 阴离子交换树脂一般交联度4 % 交换容量: 每克树脂能参加交换反应的活性基团数。单位: m mol/g ; m mol/ml 粒度:以溶涨态所能通过筛孔来表示。 10～50目 — 交换水用; 100～200目 — 分析用。 离子交换平衡常数: 1、R－A＋＋B＋ R－B＋ ＋A＋ K= [A+]、[B+]分别表示树脂中A、B离子的浓度; [A+]、[B+]分别表示水液中A、B离子的浓度; 若 K(1,说明B+ 较牢地结合在树脂上 K( 1,说明A+ 较牢地结合在树脂上 所以K说明了树脂对A+、 B+两种离子选择性交换的能力,故也称之为选择性系数。 K(, B与树脂结合能力强, 洗脱慢, t(。 选择性系数与分配系数的关系: K = = 即:分配系数不同是离子交换分离的先决条件。 3、影响K的因素: (不讲) K随交联度(而增大,还与被交联离子半径有关。 强酸性聚苯乙烯阳离子交换树脂: 同价离子,浓度相同时,随原子量增加与树脂亲和力增大。 不同价态离子,价态高的离子亲和性大,即选择性大。 (2)弱酸性阳离子交换树脂: 与(1)顺序有所不同P236 (自学) §2 薄层色谱法 TLC 操作流程: 铺板—活化—点样—饱和—展开—显色—定性,定量。 原理: 将混合组分的试液,点在铺了吸附剂的玻璃板一端,在密闭容器中用适当的溶剂 (展开剂、流动相) 展开,各组分不断地被吸附,解吸附…随展开剂前移,利用吸附剂对不同组分的吸附力 (吸附常数) 不同,产生差速迁移,而达到分离。 特点: 快速、灵敏(几～几十微克)、 高选择、显色方便。 参数: 、定性参数: 比移值 R= R= a / c R = b / c 讨论: R= 0 未移行 ( 被固定完全吸附, K(( ) R= 1 移至前沿 (组分不被固定相吸附, K ( 0 ) 一般: 0 ( R ( 1 R是薄层色谱的定性参数,在同一色谱条件下,同样结构的分子由相同的R值。(例: SMZ、TMP) 某物质，当色谱条件一致时，R定值，定性用，但重现形差。有人建议用相对可比值定性。 R= 参考斑可以是另加的物质,亦可以样品中另一组分为参考。 R值的大小,主要取决于该组分在两相间的分配系数,因此: R= V:薄层板的死体积; V:板固定相体积; K:该条件的分配系数 物质极性大, 吸附力F强; 反之,物质极性小, 吸附力弱。 K和R大小,取决与流动相极性。 其色谱过程如吸附柱色谱,不再介绍。 R最佳范围: 0.3～0.5 ,也可控制在0.2～0.8使用。 、分离参数: — 分离度 R = X、X色斑中心到原点的距离。W、W两色斑的峰宽(扫描测定)。一般亦可用纵向直径。 固定相: 吸附柱色谱的固定相薄层色谱也可以使用,但相薄层色谱所用的硅胶、Al2O3粒度比柱色谱更细。 硅胶40 (m (一般要求200目左右) 常用硅胶GF: 吸附剂、硅胶、粘合剂、石膏,掺入荧光剂254 nm,