花青素对动脉粥样硬化模型小鼠抗氧化和血脂代谢的影响.docVIP

花青素对动脉粥样硬化模型小鼠抗氧化和血脂代谢的影响 　　[摘要] 目的 探讨花青素在动脉粥样硬化模型小鼠体内抗氧化能力和血脂代谢中的作用。 方法 高脂饮食诱导基因敲除的ApoE-/-小鼠8周后，每天用不同剂量（低、中、高：50、100、200 mg/kg）的花青素对小鼠连续灌胃8周。获取血清和肝脏并分别检测各抗氧化指标和各项血脂含量。 结果 中、高剂量组血清中SOD活性的提高及血清和肝脏的MDA含量的降低与空白组比较，差异有统计学意义（P0.05）；高剂量组肝脏的SOD活性与空白组比较，差异有统计学意义（P0.05）；总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，随着剂量的增加不断降低，中、高剂量组中TG水平与空白组比较，差异有统计学意义（P0.05）；高剂量组TC和LDL-C水平与空白组比较，差异有统计学意义（P0.05）。 结论 花青素对高脂诱导的动脉粥样硬化小鼠具有抗氧化、降低血脂的功能。 　　[关键词] 花青素；ApoE-/-小鼠；氧化；血脂；动脉粥样硬化 　　[中图分类号] R543 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）08（a）-0004-04 　　体内脂代谢紊乱，可使过多的脂质沉积在血管内壁，并在脂质氧化和各种炎症反应的作用下形成动脉粥样硬化。载脂蛋白ApoE基因敲除的纯合小鼠（ApoE-/-）可正常存活和繁殖，但当给予适当的高脂饮食时，可导致各种高脂蛋白血症[1-2]，是动脉粥样硬化相关疾病病理和药理研究的主要动物模型[3-6]。花青素是一类具有多酚羟基的黄酮类化合物，主要存在于各种植物如葡萄、紫甘薯、蓝莓和黑米中，在体内具有抗氧化、抑制肿瘤及消炎等多种药理功能[7-8]。本研究以实验室前期成功建立的动脉粥样硬化ApoE-/-模型小鼠为试验动物[9]，对其用不同剂量的花青素处理，检测小鼠体内血清、肝脏的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性和丙二醛（malonaldehyde，MDA）的含量及各种血脂蛋白水平，分析花青素在动脉粥样硬化小鼠体内的抗氧化反应和血脂质代谢的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 试剂和仪器 　　电子天平（上海奥豪斯仪器公司），721型分光光度计（上海精密仪器公司），电热鼓风干燥箱（上海跃进公司）；紫甘薯花青素（青岛鹏远公司），小鼠基础饲料（贵阳医学院动物中心），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测试剂盒（南京建成生物公司），其余试剂均为国产分析纯。 　　1.2 试验动物 　　ApoE-/-小鼠购自南京大学模式动物研究所，引种协议[2012]470号。动物饲养环境条件为室温20～25℃，相对湿度40%～70%。对6周龄左右的ApoE-/-雄性小鼠进行高脂肪饲料（21.5%脂肪和0.15%胆固醇）喂养，喂食8周后，对体重为23～25 g的试验动物分为4组，每组8只。对空白组（0 mg/kg）、花青素低剂量组（50 mg/kg）、花青素中剂量组（100 mg/kg）和花青素高剂量（200 mg/kg）的小鼠进行灌胃，持续8周。试验结束后，解剖并取静脉血和肝脏用于下一步试验。 　　1.3 体内抗氧化酶活性测定 　　取肝脏组织加入10倍体积的生理盐水，在冰浴中制成组织匀浆，以5000 r/min离心10 min，取上清液进行相关指标的测定，其中通过羟胺法测定SOD活性、硫代巴比安酸（TBA）比色法测定MDA的含量，具体方法根据南京建成生物公司提供的操作说明。 　　1.4 血脂水平的检测方法 　　血清总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）水平的测定分别采用胆固醇氧化酶法（COD-PAP）及磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP），应用分光光度计测其在500 nm吸收值。LDL-C和HDL-C测定所用试剂和方法均按照南京建成试剂盒说明书进行操作。 　　1.5 统计学分析 　　采用SPSS 18.0统计软件对数据进行分析，计量资料以x±s表示，采用t检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 花青素对ApoE-/-小鼠血清和肝脏SOD、MDA的影响 　　低剂量组小鼠血清SOD、MDA值与空白组比较，改变不显著；中、高剂量组血清SOD、MDA值与空白组比较，差异有统计学意义（P0.05）；高剂量组SOD值提高了46%，而MDA降低了37%（表1）。在肝脏中，MDA下降水平在中剂量时有显著差异（P0.05）；SOD值则在高剂量时明显提高（P0.05）（表2）。 　　2.2 花青素对ApoE-/-小鼠血脂水平的影响 　　经不同剂量花青素处理后，中、高剂量组TG水平