《分子生物学教学课件》蛋白质的生物合成.pptVIP

刘皓 Email: liuhaoy@ Cell Phone: 1座机电话号码47 内容提要 讲授内容：14学时 a.蛋白质的生物合成 b.基因表达调控 c.基因重组与基因工程 d.细胞间信息传递 专题讨论：2 个， 8学时 第十二章蛋白质的生物合成（翻译） Protein Biosynthesis, Translation 蛋白质的生物合成 　——又称为翻译，它是指生物体以mRNA为模板按照mRNA分子中核苷酸的排列顺序所组成的密码信息合成蛋白质的过程。 第一节 蛋白质生物合成体系 protein biosynthesis system 模板: mRNA 原料: 20种氨基酸 运载体: tRNA 装配场所：核糖体 其它：蛋白质因子、酶、供能物质和某些无机离子 一、mRNA是蛋白质生物合成的直接模板 1. mRNA的结构 顺反子 cistron :编码一个多肽的遗传单位 多顺反子 polycistron : 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质 单顺反子 monocistron :真核细胞中一个结构基因转录生成一个mRNA分子，并只为一种蛋白质编码 2. mRNA是遗传信息的携带者 密码子/三联体密码子 （codon/triplet codon）：在mRNA的开放阅读框架内按5′至3′方向每三个相邻的核苷酸组成 一个密码子编码一个氨基酸。 起始密码:AUG 终止密码:UAA, UAG, UGA 遗传密码（genetic code） 开放阅读框架 open reading frame 开放阅读框架 open reading frame ： 指从mRNA分子5′端起始密码子AUG到3′端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列并编码一条蛋白质多肽链。 遗传密码的特点 a. 方向性 direction : 密码子及组成密码子的各碱基在mRNA序列中的排列具有方向性，翻译时的阅读方向只能按5′至3′方向。 b. 连续性 commaless : mRNA分子的阅读框架中，三联体密码子之间既无间断也无交叉，必须以3个为一组连续读下去，直至出现终止密码子为止。 d. 通用性 universal e. 摆动性 wobble 二、核糖体是蛋白质生物合成的场所 三、tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器 1．氨基酸的活化: 氨基酸与特异tRNA 结合形成氨基酰-tRNA过程 氨基酰-tRNA合成酶 aminoacyl-tRNA synthease a.高度的专一性 b.校正活性 2.氨基酰-tRNA的表示方法 表示方法: Arg-tRNAArg tRNAimet /tRNAemet 起始氨基酰－tRNA 原核生物：fMet-tRNAifMet 真核生物：Met-tRNAiMet 第二节  肽链的生物合成过程 蛋白质的生物合成过程从模板mRNA分子中阅读框架的5’-AUG开始，按三联体密码的顺序延长肽链，直至终止密码的出现 整个过程可分为： 起始 initiation 延长 elongation 终止 termination 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核糖体结合形成翻译起始复合物 translational initiation complex 起始因子 initiation factor, IF /eIF 原核生物翻译起始复合物的生成 核糖体大、小亚基分离 mRNA在核糖体小亚基定位结合 起始氨基酰-tRNA的结合 核糖体大亚基的结合 mRNA在小亚基上的定位机制： 二、肽链的延长 指根据mRNA密码序列的指导，从N端至C端依次添加氨基酸使肽链延伸直至合成终止的过程 核糖体循环 ribosomal cycle 进位 entrance /注册 registration 成肽 peptide bond formation 转位 translocation 延长因子 elongation factor, EF 2. 成肽: 由转肽酶催化 3.转位: EF-G 转位酶 三、肽链合成的终止 当核蛋白体移动到其A位对应着mRNA的终止密码时，多肽链合成终止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体大小亚基分离 释放因子 release factor, RF 步骤: a. 终止密码的辨认 b. 肽链从肽酰-tRNA中水解出来 c. mRNA从核蛋白体中分离及大、 小亚基的拆离 多聚核蛋白体（polyribosome） 第三节 蛋白质翻译后修饰和靶向输送 Posttranslational Modification  Protein Targeting