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微生物传感器的发展及其在环境监测中的应用 　　【摘 要】微生物传感器具有选择性好、灵敏度高、操作简便快速、成本低、能在复杂体系中进行在线连续监测等特点，已在临床医学、食品分析、发酵工业、环境监测等领域显示出广阔的应用前景。随着纳米技术的发展，微生物传感器的研究和应用取得很大的进展，已经成为最有用的监控环境的手段之一，本文综述了微生物传感器在监测大气、水质、土壤污染等方面的应用，并对其前景进行了展望。 　　【关键词】微生物传感器；纳米技术；污染检测；环境 　　0 引言 　　由于人们在追求经济效益的同时对环境保护的意识不够，环境污染变得突出，但传统的检测方法通常需要一定的分析技术，专业的实验室，人们需要找到一种简单，快速，便携的方法来检测各种有机和无机化学污染物，生物传感器可很好的解决这个问题。根据生物传感器中所用分子识别元件上的敏感物质不同，可以将生物传感器分为：酶传感器、微生物传感器、免疫传感器、组织传感器、细胞传感器。其中酶传感器和微生物传感器研究得最多，应用也最为广泛。本文主要介绍微生物传感器的发展及其在环境检测中的应用。 　　1 微生物传感器的发展过程 　　微生物传感器是指利用一定的固定化方法将生物敏感元件（对特定污染物有感应能力的微生物菌株）与具有信号转换功能的介质相连，并借助一定的设备将信号放大输出。由于微生物传感器的核心部分是具有生物活性的微生物细胞，而微生物在其数量、大小、繁殖、遗传改造等方面均具有独特的优势，因此可以满足环境监测中快速简单、原位、低成本的要求。 　　1975年Devis[1]制成了第一支微生物传感器。在微生物传感器研制中最关键的是微生物的固定技术，固定后的微生物应尽可能保证细胞活性和避免细胞从膜中流失，以延长微生物传感器的使用寿命，传统的生物材料固定方法包括物理吸附、共价键合、交联到一定的载体基质上或包埋于有机聚合物的基质中，然而这些方法都存在稳定期短和固定时引起微生物的损伤等缺陷。 　　纳米技术的出现提供另一种更好的固定方法，纳米管与聚合物复合材料用于电化学传感具有很多优点，如制备简单，易于制成同一厚度的膜等，可以有效地提高生物传感器的重现性。导电聚合物（如聚吡咯、聚苯胺、聚嚷吩等）制成的导电聚合物膜具有良好的导电性，易于电子在生物活性物质与电极之间传递，可用于制作第三代生物传感器。10年前已经出现的微生物燃料电池（（Microbial FuelCell，MFC））技术正进入快速发展时期，这些进步均有助于促进了微生物传感技术的发展。 　　2 在环境监测中的应用 　　2.1 大气检测 　　SO2是酸雨酸雾形成的主要原因，传统的检测方法很复杂。 Sasaki（1997）将一种氧化亚铁硫杆菌（Thiobacillus ferrooxidans）制成微生物传感器，可以监测酸雨中的硫酸盐。王晓辉等[2]分别以氧化硫硫杆菌和多功能硫杆菌为分子识别元件，制备了硫化物和亚硫酸盐微生物电极，实验证明，电极的响应时间为3～6分钟，以氧化硫硫杆菌为分子识别元件的电极选择性好，它对S2-的线性范围为0.06～3.0mg/L，对SO32-的线性范围为0.7～32mg/L。但对于此类传感器后续报道不多。此外还有用于NO2检测的微生物传感器[3]。 　　2.2 水质监测 　　2.2.1 BOD检测 　　生化需氧量（Biochemical Oxygen Demand）简称BOD，是水体中微生物分解有机物的过程中消耗水中溶解氧的量，以mg/L表示。BOD的测定对控制水体污染具有更重要的意义，传统测定BOD的方法需要5天，用传感器测定只需十几至几十分钟，胡磊等[4]采用接枝二茂铁为介体的微生物传感器测量污水的BOD。结果表明，传感器的线性范围为2～300mg/L，连续测量20个样品的精密度为4.2%，能连续工作35天。通过对实际水样的测试表明，测得的BOD与BOD5，具有良好的相关性。 　　虽然微生物电极法可缩短测定时间，但微生物固定化膜的制作工艺复杂且容易污染，同时单一菌种底物利用范围有限，在一定程度上限制了微生物电极的使用。近年来，人们利用从污水和活性淤泥中富集的电化学活性微生物，构建了多种有介体或无介体微生物燃料电池，同时发现电流（电压）或电子库仑量与电子供体的含量之间存在对应关系，因此微生物燃料电池能用于某些底物含量的测定，如废水BOD[5]以及有毒物质[6]等，其中用于废水中BOD测定的研究最为成熟。 　　2.2.2 重金属检测 　　重金属污染广泛存在于环境中，它能通过生物富集作用对动植物及人类产生危害。利用分析化学方法检测重金属离子对其生物危害缺乏直接检定，生物传感器检测重金属离子吸引了越来越多的研究兴趣。 　　发光微生物传感器是目前生物毒性测试中研究最多的微生物传感器之一