LED新光源在铁皮石斛组织培养中的应用.docVIP

LED新光源在铁皮石斛组织培养中的应用 　　【摘 要】铁皮石斛因具备抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力的功效而受到人们的极大需求，但野生铁皮石斛已濒临灭绝，而传统方法其组织培养环境中的光源模拟也存在很大问题。本文提到了将LED作为一种新兴的电光源技术引入到铁皮石斛组培中，以解决其光源问题。与传统电光源相比，LED光源具有体积小、光强可调、冷光源、能效高等优点，通过试验研究进一步证实了LED光源可恰当产生铁皮石斛所需的最佳光质、光强与波长，为铁皮石斛组织培养成功提供了有效的保障。 　　【关键字】LED；铁皮石斛；培养；光质；光强；光周期 　　1 前言 　　铁皮石斛是兰科附生植物的重要代表植物，自古被列为“中华九大仙草之首，具有极高的药用价值，现代药理研究表明，铁皮石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力及扩张血管的作用。它主要生于海拔1600m的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润的气候和半阴半阳的环境，不耐寒。因生长周期缓慢而极难存活，加上人类的掠夺性采摘，野生铁皮石斛已濒临灭绝。20世纪80年代，铁皮石斛被国家列为重点保护的珍稀濒危药用植物[4]，但因其特殊的药用价值，将铁皮石斛进行规模化、集约化组织培养已迫在眉睫，这种需求也引发了对特种植物组织培养综合环境的研究。 　　在诸多影响植物生长发育的环境因子中，光照起到了至关重要的作用。适度光照不但是植物生长所需能量的来源，而且光合作用、光周期调节对于植物的生长发育、开花结果产生的作用也是其他环境因子无法取代的。光作为一种触发信号，影响着植物生长发育的许多方面，如种子发芽、脱黄化作用、营养形态学（ 茎的生长和叶的伸展）、24h节律的形成、基因表达、向地性和向光性[5]等。不同的光强和光质可以导致截然不同的生长形态，不同的植物种类对光的反应也不尽相同。 　　对于特殊植物品种来说，自然光照难以满足植物组织培养所需的环境，因而常利用电光源替代自然光源为其提供光照。目前，在组织培养研究中大都使用传统电光源，但传统电光源面临着三大难题：第一由于绿光、红外光和远红外光在传统电光源中占有比例较大，而植物又不能对其加以利用，使得植物能效仅为0.5%～1%，电能浪费极大；第二，发热量大。在传统电光源中有相当多的能量以热效应方式传递到环境中，使环境温度上升，增加了空调制冷的耗电量；第三，由于灯具表面的温度较高，难以近距离照射植物，降低了植物组织培养的空间利用率，灯具散热会引起组培瓶结露，也会对组培苗本身造成不良影响。 　　针对以上传统光源的3点不足之处，LED光源具备的新特性解决了传统光源无法解决的问题。第一，LED激发单色发光光谱，输出光谱的半波宽为±20nm左右，可以按照植物的不同需要进行不同搭配。选用的LED光谱吸收波峰可以完全与植物光合需求相吻合，避免了其他发热光谱的混入，具有光效高、耗能少的优势；第二，据统计，LED的耗电量仅为白炽灯的1/8、荧光灯的1/2【1-3】，大大降低了电能损耗；第三，LED为冷光源，可以接近植物表面照射，而不会出现叶片灼伤、瓶壁结露的现象，因此可以实现植物的集约化生产，极大地提高了组培室空间利用率。 　　本文应用LED新型光源对铁皮石斛组织培养进行了试验研究。首先介绍了试验素材、阐述了试验方法，接着分别从光质、光强和光周期3个方面对铁皮石斛组培影响进行试验，最后对LED光源在组培应用中所存在的问题进行了讨论，并给出相应结论。 　　2 组培实验素材与方法 　　2.1 组培实验材料 　　以铁皮石斛作为实验对象，采用无菌试管苗进行第一次组培，生根培养基为1/2MS + 0.2 mg?L-1 NAA +25 g?L值 蔗糖+6 g?L-1琼脂，将pH调至5.6～5.8。每个容积为350mL的玻璃瓶内接种外植体，选用高约3cm、鲜重约300 mg的铁皮石斛单腋芽，培养室相对湿度为80%±2%、温度为（20±2）℃。 　　2.2 组培试验方法 　　采用LED光源配比方法。根据植物对光的颜色敏感，尤其是对红、远红光和光蓝3种光的极其敏感性。植物生长所需的光合有效辐射（PAR）在波长400～700nm之间，其中在红光630～660nm之间对光合作用与光周期效应有显著影响；蓝光400～520nm之间时，叶绿素与类胡萝卜素的吸收比例最大。红光与蓝光组合的光谱能量分布与叶绿素吸收光谱一致，因此可以通过增加净光合速率促进植物的生长和发育[6]。LED能发射窄单色红光光谱和蓝光光谱，与叶绿素a、b的吸收波长是相匹配的，而且LED光源可区分出不同的光质，可通过不同配比组成合成光，进而影响组培苗的生长发育和生理指标。 　　以铁皮石斛幼嫩叶片为外植体，以不同LED充当光源，记录不同LED光源下铁皮石斛组培苗的生长数据，为铁皮石斛在LED下的组培繁殖提供一定的依据。选取