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测定土壤中三硝基酚类物质 　　摘要建立了超高效液相色谱串联质谱（UPLCMS/MS）同时测定3种三硝基酚类残留量的方法。样品经改进的QuEChERS（快速、简单、廉价、高效、灵活和安全）前处理方法一步完成提取净化，经添加1%甲酸的乙腈提取，C18和石墨化炭黑（GCB）吸附剂填料净化，提取液经离心后直接过膜上机检测，提取和净化的效果能够满足检测要求。UPLCMS/MS方法采用Accucore PFP 色谱柱（150 mm× 2.1 mm，2.6 μm），柱温30 ℃，流动相为乙腈和乙酸铵缓冲盐，梯度洗脱，流速0.3 mL/min，电喷雾电离源负离子模式（ESI 　　Symbolm@@ ）、多反应监测（MRM）模式检测，外标法定量。2，4，6三硝基苯酚、2，4，6三硝基间苯二酚和2，4，6三硝基均苯三酚3种三硝基酚类物质在0.005～5.0 mg/L范围内线性关系良好，相关系数为0.9942～0.9962。在0.01，0.1和1.0 mg/kg水平下的平均加标回收率为79.3%～94.8%； 相对标准偏差为3.1%～6.6%； 方法的检出限（S/N=3）为0.002～0.005 mg/kg。本方法简单、快速、灵敏、准确，满足环境污染检测的要求。 　　关键词超高效液相色谱串联质谱法； 2，4，6三硝基苯酚； 2，4，6三硝基间苯二酚； 2，4，6三硝基均苯三酚； QuEChERS方法； 土壤 　　1引言 　　随着工业发展，三硝基酚类物质由于其特殊的结构，被广泛用于含能材料、医药、农药、染料以及橡胶工业生产中＼[1，2＼]。三硝基酚类主要有2，4，6三硝基苯酚（俗称苦味酸，TNP）、2，4，6三硝基间苯二酚（俗称斯蒂芬酸，TNR）、2，4，6三硝基均苯三酚（TNPG）。由于三硝基酚类物质生产和使用过程会流失到土壤和周围环境中，能持久存在于土壤环境中，破坏土壤结构，阻碍或抑制土壤微生物和植物的生命活动；同时由于其具有较强的水溶性，可以通过渗透和降水的淋洗作用污染地表水体系，导致病变，危害人类健康。因此，三硝基酚类对环境和人类健康造成的危害将备受关注。 　　目前对于三硝基酚类物质的环境控制研究多集中在降解菌种的培养、降解反应器的研制等污染降解处理方面＼[3～7＼]，在水质、土壤的污染监控检测方面却相对滞后，且多采用分光光度法对三硝基酚类总量进行检测＼[8＼]。目前，检测硝基酚类的方法主要有分光光度法＼[9＼]、气相色谱法＼[10＼]、液相色谱法＼[11，12＼]、气相色谱质谱联用法＼[13＼]，这些相关的方法都只涉及部分硝基酚类，对于三硝基酚类特殊的强极性、热不稳定的化学性质所适合的检测方法研究较少。 　　目前，较常用的前处理方法有固相提取（SPE）＼[14～17＼]、加速溶剂提取（ASE）＼[18～20＼]、微波辅助提取（MAE）＼[21～23＼]和超声波辅助提取（USE）＼[24～26＼]等，这些方法取代了传统的耗费大量时间和溶剂的普通液液提取，但是通常需要后续的较繁琐的操作步骤，甚至要求特殊的设备或者特殊的高温等环境下进行，而最初应用于农药残留检测的QuEChERS（Quick， Eesy， Cheap， Effective， Rugged and Safe）方法＼[27，28＼]是一种快速、简单、高效的样品前处理方法，在食品和生物安全领域得到了广泛应用，但在净化土壤、检测硝基酚类应用少见报道。本研究将超高效液相色谱质谱联用法（UPLCMS/MS）应用于三硝基酚类多残留痕量快速分析，克服了目标化合物强极性、易分解、难以检测分离所带来的弊端，具有灵敏度高、确证性强、抗干扰能力强等优势，将改进的QuEChERS方法应用于土壤样品前处理，考察了不同吸附剂的净化效果，同时简化了前处理步骤，提取液直接进行UPLCMS/MS分析，可实现土壤中3种三硝基酚类物质的同时定性与定量检测。 　　2实验部分 　　2.1仪器与试剂 　　AcquityTM超高效液相色谱仪（UPLC）， Quattro PremierTMXE三重四级杆质谱仪（Waters 公司）； AllegraTM X22R型离心机（Beckman公司）； Sk8200LH超声波清洗器（上海科导公司）； MilliQA10超纯水机； IKAMS3漩涡混合器； 0.22 μm有机过滤膜（Waters公司） 　　3种三硝基酚类标准品分别为2，4，6三硝基苯酚（TNP）、2，4，6三硝基间苯二酚（TNR）和2，4，6三硝基均苯三酚（TNPG）， 均购自德国Dr. Ehrenstorfer GH公司（纯度98%）； 吸附剂填料N丙基乙二胺（PSA）、石墨化碳黑（GCB）、C18（Agela公司）； 乙腈（色谱纯，德国Merck公司）； MgSO4、乙酸铵（分析纯）；