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葡萄霜霉病拮抗细菌N6的分离、筛选及鉴定 　　摘要：筛选葡萄霜霉病菌的拮抗菌株，为该病害的生物防治提供更多的资源。采用稀释平板分离法，从3个品种的健康葡萄叶片上分离得到细菌153株。初筛采用平板对峙法，得到5株拮抗辣椒疫病菌的菌株。采用叶盘法进行复筛，得到防治葡萄霜霉病效果好并且稳定的菌株N6，其防效达到74.2%。通过对菌株N6的形态、生长特性、生理生化反应、16S rDNA序列测定和系统发育分析，鉴定该菌株为砖红微杆菌（Microbacterium testaceum）。 　　关键词：葡萄霜霉病菌菌株；拮抗细菌；分离；筛选；鉴定砖红微杆菌（Microbacterium testaceum） 　　中图分类号：S432.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）17-4063-03 　　Isolation， Screening and Identification of Antagonistic Bacteria Strain N6 Against Grape Downy Mildew 　　GUO Ji-ping1，2， MA Guang2， ZHU Hui-xia2， LIU Chang-yuan3， FU Jun-fan1 　　（1. College of Plant Protection， Shenyang Agricultural University， Shenyang，110161，China； 　　2. Department of Life Science， Hengshui University， Hengshui 053000， Hebei，China； 　　3. Institute of Plant Protection， Liaoning Academy of Agricultural Sciences， Shenyang 110161，China） 　　Abstract： The antagonistic bacteria against grape downy mildew were screened to provide more resources for biologically controlling of the disease. With streak plate method， 153 bacterial strains were isolated from the health grape leaves of three varieties. Screened by a dual culture technique， 5 strains exhibiting antagonistic activities against pepper phytophthora blight were obtained. Using the leaf disc for secondary screening， N6 was screened from the 5 strains. N6 had the better inhibitory effect， with biocontrol efficacy of 74.2%. The results showed the strain was identified as Microbacterium testaceum， through analyzing its morphological， physiological and biochemical characteristics， 16S rDNA sequence and phylogenetics. 　　Key words： grape downy mildew； antagonistic bacteria； isolation； screening； identification 　　葡萄霜霉病是一种世界性病害，病原为葡萄生单轴霉（Plasmopara viticala），属鞭毛菌亚门卵菌纲霜霉菌目霜霉菌科单轴霉属[1]。该病原是一种专性寄生真菌，菌丝体为无隔、多核菌丝，在寄主细胞间扩展蔓延，以瘤状吸器从寄主细胞内吸取营养。发病部位产生白色霉霜状霉层，即病菌的孢子囊及孢子囊梗。葡萄霜霉病以卵孢子在病组织中或随病叶在土壤中越冬，是病害的初侵染源[2]。 　　葡萄霜霉病目前的防治手段主要是使用抗性品种[3，4]、改进生产管理技术和化学防治[5，6]。常年使用化学农药会导致病原菌产生抗药性、环境污染及农药残留等问题。随着绿色农业的蓬勃发展，利用生物防治植物病害越来越受关注。如利用枯草芽孢杆菌B-FS01对葡萄霜霉病进行防治，防效达88.25%，但该菌剂还