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食品卫生微生物检测用培养基质量控制探讨 　　【摘 要】 培养基质量是微生物检测工作的基础，直接决定检测结果的准确性、可靠性。结合实验室实际情况，明确了培养基的购置、贮存、制备、性能测试等过程的质量控制措施，以确保培养基质量满足检测要求。 　　【关键词】 培养基 质量控制 微生物检测 　　食品微生物检测是不同食品标准规定的食品必检项目之一，是按照一定的检测程序和质量控制措施，确定单位样品中某种或某类微生物的数量或存在状况。而培养基质量是微生物检测工作的基础，直接决定检测结果的准确性、可靠性。由于食品微生物培养基品种较多，目前大约有数千种不同的培养基，有液态、半固体、固体几种形式。而培养基质量控制国内可以参考的资料不多，国外的起点较高，又不适宜我国国情，依据GB/T27405《实验室质量控制规范 食品微生物检测》（1），结合实验室实际情况，明确了培养基的购置、贮存、制备、性能测试等过程的质量控制措施，以确保培养基质量满足检测要求。 　　1 培养基的采购、验收和储存 　　培养基的采购应从合格供应商中选择厂商采购，每批培养基需供应商提供批号和相对应的质检报告。购买的培养基到货后，由药品管理员和微生物检测人员共同核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。验收合格后，交由检测人员接受保管，并在每瓶培养基上加贴信息标签。 根据不同的培养基的特性，妥善保存。干粉培养基应保存在阴凉干燥处，要避免阳光直射；开瓶后的干粉培养基易吸湿，应注意防潮，并确保在有效期内用完。需低温保存的培养基应存放在相应温度的低温柜中。 　　2 培养基的配制 　　2.1 自制培养基 　　自制培养基，要严格按照所检样品检测方法标准要求的配方进行准确称量配制、称量时各种不同组分，要用专用的角匙，避免交叉污染；干粉培养基易吸潮，如房间环境湿度较大时，应提高称量速度，完毕后及时盖紧瓶盖。制备培养基的水PH值在5.5―7.5之间，应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水，最好不使用离子交换器生产的去离子水。严格控制配制过程中灭菌的温度、时间，配制完成后应检查PH值，观察其颜色、透明度、杂质、凝胶稳定性等。 　　2.2 成品培养基 　　随着市场经济的发展，成品微生物培养基使用越来越多，成品培养基的特点就是方便、快捷、但成品较高。需要注意的是不同厂家，或同一厂家不同批号的相同培养基不能混用。 　　2.3 培养基溶解注意事项 　　（1）加热溶解时不能用使用铜或铁锅，防止金属离子混入培养基中，影响微生物的生长[1]； 　　（2）溶解培养基容器的大小需大于溶解后培养基总体积的2倍以上，避免在加热溶解过程中，培养基受热，体积膨胀溢出； 　　（3）含有琼脂类的培养基，在加热溶解前可浸泡数分钟，加热时一定要进行搅拌，以防琼脂粘在容器底部；对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，反复冻容最多只能两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去； 　　（4）为避免烧焦和沸腾溢出，量少的培养基最好使用水浴进行加热； 　　（5）烧糊的培养基营养物质被破坏，并可产生有毒物质，如发现焦化，或未溶解均匀前培养基有溢出，该培养基即不能使用，应重新制备。 　　2.4 培养基的灭菌 　　（1）常用培养基一般采用高压蒸汽湿热灭菌，通常是121℃15min，含糖或特殊培养基，按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。有些菌种代谢周期较短，已配制好的培养基必须在15分钟内灭菌，可避免微生物生长繁殖而消耗养分，改变培养基的酸碱度。为避免高温破坏培养基的营养成分，降低琼脂的凝胶强度，必须严格控制灭菌温度和时间，不可重复灭菌。 　　（2）部分培养基（如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养基等）只能煮沸灭菌。 　　（3）对热敏感的培养基或添加物质，应采用膜过滤方法进行过滤灭菌。 　　（4）即用型不需灭菌，应参见相关标准或培养基使用说明书，直接使用。 　　（5）常规应用指示剂监测灭菌过程；可用生物指示剂如嗜热脂肪芽孢杆菌监测杀伤芽孢的效果。 　　（6）灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，不能长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。并应加贴标识，标注：名称、配置日期、成分、pH值等信息。 　　3 培养基质量控制方法 　　3.1 理化试验方法 　　3.1.1 培养基物理性检测[2] 　　外包装密封性应完好，无泄漏等现象；颜色一般为浅色，状态应为干燥粉末，无吸潮结块现象；成品培养基应防止过分失水，还应注意成品培养基如平皿裂纹、充碟不均、溶血（血平板）、冷冻、过多的汽包和斑点、污染，表面凹凸不平等现象，如有上诉缺陷，应做好相应记录，并及时通知供应商，查明原因并加以纠正。 　　3.1.2 PH值的测定 　　灭菌