有机地球化学的方法程序.ppt

第三章 有机地球化学的分析方法 索氏抽提器 常用的络合剂为5 1 10-10m 分子筛、尿素、硫脲等，也有用7 或者13 分子筛分离的。5 分子筛是天然或人工泡沸石，其组成为Ca4Na4 [Al12Si12O48]·29H2O， 具有5 大小的孔径，能选择吸附正烷烃，络合比较完全，但解吸困难，流程长，采用正己烷或异辛烷回流解吸需要15天左右才能完成。使用1：1的24％氢氟酸和苯混合物破坏5 分子筛，释放出正烷烃的方法解吸比较完全。分离正构和异构烷烃宜用此法。 尿素是一种笼络或包留物。其特点是在正烷烃及其衍生物存在下，尿素分子头尾相接，以氢键形式排列成平行管状或螺旋状的六角形结晶，通道中心的直径约5 A，正好适合于直链分子或其直链衍生物分子在平面中的曲折排列，它对正烷烃的包留作用不是烃类所特有的，大量的单官能团和二官能团的化合物也可被尿素包留，如烯烃、醇、醚羰基化合物以及一个、二个羧基的酸类及酯类、烷基卤化物、硫醚、胺、二胺类、腈和二腈类等。尿素与六个碳原子以上的直链烃最容易形成包留物，支链或苯环因其分子太大不能被包留。尿素法分离正烷烃的优点是方法简单，流程短，尤其是解吸特别容易，只需蒸馏水水解即能释放出被包留物。缺点是包留不完全，有时带某些烯烃等组分。 硫脲也是常用的包留剂，它形成的包留络合物结构上很像尿素络合物。它的单元小室是菱形的螺旋结构，中心通道直径为7 。因直链分子太小包不住，故适于包留支链烷烃，特别适合于分离异戊二烯烃化合物。带有两个甲基或分子大小与之相近的卤代烃也可与硫脲形成包留物。而乙基和异丙基则不能与硫脲络合。硫脲也可包留环烷烃。简单的芳烃化合物如苯、萘、蒽不能被硫脲包留。硫脲包留物同样用蒸馏水解吸。 3 皂化法 用氢氧化钾的甲醇溶液回流或索氏抽提，将样品中呈结合形式存在的脂肪酸酯转变成脂肪酸钾盐的方法称为皂化法。皂化后的脂肪酸盐类可酸化为游离脂肪酸。一步抽提-皂化法可在索氏抽提器中用苯—甲醇、氢氧化钾溶液回流萃取，再加水分离成水相和有机 苯 相，脂肪酸钾盐进入水层，而烃类和极性较小的化合物进入苯层中，先移去有机相,而后用盐酸酸化水相将钾盐转化为游离脂肪酸，以乙醚萃取浓缩即得脂肪酸。 极性组分的衍生反应 一些极性化合物，如脂肪酸、氨基酸、链状醇类和甾醇等，在进行气相色谱分析前，需要进行衍生反应。其目的主要有二：一是将非挥发性的化合物变为挥发性的化合物，变高沸点为低沸点，使其在气相色谱上可挥发气化，进行分析；二是通过衍生反应，增大相似化合物之间的沸点差别，从而改善气相色谱的分离效果，利于定性定量。 气相色谱分析常用的衍生方法是酸类的酯化和醇类与酸 类的硅醚烷化 1 酯化 脂肪酸甲酯化主要有三种方法：①脂肪酸在含有少量硫酸或盐酸的甲醇溶液中回流，用苯抽提，这种方法酯化率较低，不常采用。②重氮甲烷法：采用亚硝基甲基尿和氢氧化钾制备重氮甲烷。重氮甲烷的乙醚溶液滴加到脂肪酸水溶液中即得脂肪酸甲酯，此法酯化较完全，常用于小样品。③三氟化硼法：用14％BF3甲醇溶液作为酯化剂。由硼酸酐和氟硼酸钠制备生成BF3气体，直接通人脂肪酸甲醇溶液中即得脂肪酸甲酯。此法优点是产率高，速度快，常用于大量样品分析。用此法可分析碳数高达C36的脂肪酸。 对于分子量较大的膦脂、甘油脂、甾基酯和蜡酯，可采用甲醇钠 Na Methoxide ／甲醇试剂 0.5N ，直接转化为适于气相色谱分析的甲酯。 2 硅醚烷化 许多含有一个活泼氢的极性化合物如脂肪酸类、羟基酸 α或β 、醇类、甾类化合物、醣、氨基酸、酚等多官能团化合物，都可以用如六甲基二硅烷 HMDS 、二或三甲基氯硅烷 DMCS或TMCS 、氯甲基二甲氯硅烷 CMDMCS 、双- 甲基硅烷基 -乙酰胺 BSA 、N，O-双- 三甲基硅烷基 -三氟乙酰胺 BSTFA （TMS）衍生物进行气相色谱分析。硅烷化反应快，适合于微量分析。 其中，最为常用的是N，O-双- 三甲基硅烷基 -三氟乙酰胺 BSTFA 。直接在已祛除有机溶剂的样品中加入BSTFA，70℃下静置30分钟后即可直接进行气相色谱分析。可以此法硅醚烷化的样品包括：链状醇、甾醇、藿烷醇、酚类和各种羧酸。 ② 多离子检测 高效液相色谱-质联用仪（LC-MS） 1 LC/MS联用及其应用 分析仪器和方法 目前用于定量分析类脂物生物标志化合物的仪器,主要有两个系列。 色谱系列:包括气相色谱仪 GC 、高温气相色谱仪 HT-GC 、裂解气相色谱仪 PY-GC 、液相色谱仪 LC 和高效液相色谱仪 HPLC 等。 色谱-质谱联用系列:包括气相色谱-质谱联用仪 GC -MS ，适合于可汽化有机组分分析；液相色谱-质谱联用仪 LC-MS ，适合于不可汽化有机组分分析；气相色谱-质谱-质谱联用仪 GC-MS-MS ，适合于生物组分