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WB（Western Blot）原理及相关试剂 一、WB的基本原理和用途 原理： 通过电泳区分不同的组分,并转移至固相支持物,通过特异性试剂(抗体)作为探针,对靶物质进行检测,结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点,可检测到低至1～5ng(最低可到10-100pg)中等大小的靶蛋白.  应用： Western blot主要用于未知蛋白质的检测及抗原组分、抗原决定簇的分子生物学检测；同时也可用于未知抗体的检测和单克隆抗体的鉴定等。 二、实验操作步骤 第一步：标本的制备绝大多数蛋白抗原的初次预实验检测可直接在SDS上样缓冲液中裂解组织和细胞。检测成功后，可以采用其它方法制备制备亚细胞蛋白组分（蛋白的提取可以是总蛋白、核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白、细胞器蛋白等）。 一般客户自己配制细胞裂解液（如RIPA裂解液，裂解液中需要加入蛋白酶抑制剂cocktail）来进行蛋白的提取。 Biovision蛋白提取系列，蛋白酶抑制剂cocktail 相关产品信息 供应商 目录号 产品描述 规格 价格 Biovision K256-100 Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit 100 assays Biovision K266-100 Nuclear/Cytosol Fractionation Kit 100 assays Biovision K267-50 Cytosol/Particulate Separation Kit 50 assays Biovision K268-50 Membrane Protein Extraction Kit 50 assays Biovision K269-500 Mammalian Cell Extraction Kit 500 assays Biovision K270-100 FractionPREP Cell Fractionation Kit 50 assays Chemicon 2910 Whole Cell Extraction Kit 100 extractions Chemicon 2145 Compartment Protein Extraction Kit 1 kit 以下试剂盒采用物理学的方法和独特的试剂，快速的将细胞浆蛋白和细胞颗粒分开，避免了传统分离方法所致的两组分间尤其是小分子间物质，从而可以准确地进行目的分子亚细胞定位研究。 Biovision K267-50 Cytosol/Particulate Separation Kit 50 assays 石蜡包埋组织蛋白抽取：以下试剂盒使用专利的liquid tissue技术和试剂，专为福尔马林固定，石蜡包埋组织（FFPE）中提取蛋白而设计。使得该类标本的检测不再局限于IHC的方法，提取得蛋白可直接用于膜检测分析或芯片检测，尤其适用于蛋白质组分析。 目录号 产品名称 供应商 规格 价格 554-00-02 PROTEOSOL TIS EX SYS,10AP KPL 10 reactions 目录号 产品名称 供应商 规格 价格 7727L Biotinylated Protein Ladder Detection Pack CST 325 mini-blots 7727S Biotinylated Protein Ladder Detection Pack CST 65 mini-blots 需要SDS、PAGE胶、蛋白质Marker（MBI蛋白质Marker（SM0671/SM0661/SM0441/SM0431））、2×上样缓冲液（MBI）、DTT等 相关产品 供应商 目录号 产品描述 规格 价格 MBI SM0431 Protein Molecular Weight Marker 2x1000 μl MBI SM0441 Prestained Protein Molecular Weight Marker 2x250 μl MBI SM0661 PageRuler? Protein Ladder 2x250 μl MBI SM0671 PageRuler? Prestained Protein Ladder 2x250 μl MBI SM1811 PageRuler Prestained Protein Ladder Plus 2x250 ul MBI R0861 DTT 5 g MBI R0862 DTT 25 g MBI R0891 Loading Buffer Pack 1 pack CST 7722 Blue Loading Buffer Pack 1 Pack