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Plant chromosomal engineering植物染色体工程 Plant chromosomal engineering 按照一定的设计有计划的消减、添加和代换同种或异种染色体,引发产生各种整倍性变异和非整倍性变异,从而改良植物的遗传基础、培育符合人们需要的新种质或新品种的方法和技术 Part 1 Production of Haploids 1. Haploid 单倍体是指孢子体中只含有配子体染色体数目 单套 的植株。 The term haploid refers to those plants which possess a gametophytic number of chromo-somes single set in their sporophytes. ①monohaploids单元单倍体 即具有来自二倍体中染色体数目一半的单倍体,如玉米,大麦等; ②polyhaploids多倍单倍体 即具有来自多倍体中染色体数目一半的单倍体,如马铃薯,小麦等。 3. Production methods Androgenesis 雄核发育 单雄生殖 :通过花药培养生产单倍体 Gynogenesis 孤雌生殖 :指通过于房或胚珠培养发育成单倍体,雌配子体或者雌配子体被诱导进行孢子体发育。 3.1 ANDROGENIC METHODS 雄核发育方法 用雄核发育方法生产单倍体是指使被子植物的雄配子体发育成单倍体,如小孢子 未成熟花粉 。 可以通过培养离体花药或离体花粉 小孢子 得到单倍体。 3.1.1 Anther culture 花药培养 外植体选择 3.1.2 Microspore Culture小孢子培养 单倍体植株可以通过雄配子细胞 即小孢子或未成熟花粉 的离体培养而获得。 3.1.3 The various factors governing the success of androgenesis 影响雄核发育的因素 1 Genotype 基因型 2 Physiological status of the donor plants 植株的生理状态 3 Stage of pollen 花粉的发育时期 4 Pretreatment of anthers 花药预处理: Cold pretreatment , Hot treatment , Chemical treatment 5 Culture media培养基的成分 6 Culture conditions 培养条件 7 Inoculation density and direction 接种密度和方向 3.1.4 Process of androgenesis雄核发育过程 ①直接雄核发育:不经过愈伤组织,胚直接由花药的小孢子发育形成。 i direct androgenesis: embryos originating directly from the microspores of anthers without callusing ②间接雄核发育,即器官发生途径:小孢子增生形成愈伤组织,愈伤组织被诱导分化形成植株。 ii indirect androgenesis i.e. organogenic pathway: microspores undergo proliferation to form callus which can be induced to differentiate into plants. 胚状体发育途径 愈伤组织发育途径 3.2 GYNOGENIC HAPLOIDS雌核发育单倍体 被子植物的胚囊或雌雌配子体能在体外触发孢子体发育。与小孢子体发育而来的雄核发育植物相比,这些植物被称为雌核发育植物。 授粉和未授粉子房都能被培养。为了生产单倍体,在开花前24-48h切除花芽以得到未授粉的子房。除去花萼、花冠和雄蕊,再对子房进行表面消毒。培养前,把花柄和花瓣的尖端部分切去,以切口端向下的方式把子房植入培养基。 Factors affecting gynogenesis影响单雌生殖的因素 1 Genotype基因型 2 Growth condition of the donor plant.供体植物的生长条件 3 Stage of harvest of ovule收集的胚珠发育时期 4 Embryo-sac stage胚囊发育时期 5 Culture conditions培养条件 6 Seasonal effects季节效应 7 Physical factors物理因素 4. The ploid
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