对我国地方猪种若干特性的分子生物学研究.pptVIP

2005-11 对我国地方猪种若干特性的分子生物学研究 王林云 曾勇庆 高勤学 谈永松 周 波 刘 梅 黄瑞华 （南京农业大学 动物科技学院） 围绕地方猪种进行研究的队伍 牵头人：王林云教授 团队主要成员 教授：刘红林、徐银学、谢庄、王根林 其他成员：黄瑞华、韦习会、陈 杰、周 波、贾 超、刘根桃、孔令勇、 谈永松、刘 梅、孙 梅、李隐侠、 曾永庆、高勤学、徐世永、虞德宾等 研究基金 国家自然科学基金项目 科技部863项目 教育部博士点基金项目 农业部948项目 江苏省科技厅自然科学基金、高新技术研究、科技攻关等项目 江苏省教育厅高新技术转化项目 江苏省农林厅三项工程项目 上海农委科教兴农项目 企业委托项目 研究工作涉及到的地方或培育猪种 太湖猪（二花脸、梅山） 姜曲海猪 莱芜猪与新莱芜猪 五指山猪 新淮猪与新淮猪瘦肉系 苏太猪 申农1号 苏钟猪 研究工作涉及到的性状 生长缓慢机理研究（太湖猪） 高繁殖机理研究（太湖猪） 猪胴体品质与肉质研究 免疫机理研究（太湖猪） 抗病机理研究（免疫球蛋白相关性研究、MHC II型研究） 涉及应急敏感基因(HAL)、雌激素受体基因(ESR)、促卵泡素(FSH)β基因和促卵泡素受体基因、瘦蛋白(肥胖)基因(OB基因)、IGF-1基因、IGF-2基因等 1、莱芜猪肌肉组织中A-FABP mRNA  表达量与肌内脂肪关系（曾勇庆等，2004） 肌肉脂肪含量（肌间脂和脂内脂，体重90kg） 莱芜猪达10.42% 新莱芜猪（50%莱芜猪血统）下降，但仍达6.65% A-FABP基因 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（adipocyte fatty acid-binding protein, A-FABP）能与脂肪酸特异性结合，参与甘油三脂的生成，并影响肌内脂肪（IMF）的沉积（ Veerkamp等 1995） A-FABP基因位于4号染色体上，序列长8144bp 有四个外显子分别编码24、58、34和16个氨基酸;三个内含子，分别为2629bp、840bp和471bp（Gerbens等，2000年） HH6,HL5,HL4,HL3,LL2,LL1,LL0 莱芜猪和新莱芜猪间的差别 用荧光定量检测技术对莱芜猪和新莱芜猪不同体重阶段的肌肉组织A-FABP mRNA表达量进行定量检测 结果： A-FABP mRNA丰度有一明显的峰值 存在明显的品种差异（P0.01） 莱芜猪与新莱芜猪的A-FABP mRNA表达量(每组6头） 2 、猪苹果酸酶基因（ME）与肌肉脂肪关系的研究（高勤学等，2004） 不同体重大约克和二花脸猪肌内脂发育变化 不同日龄二花脸和大约克猪肌内脂发育变化 苹果酸酶（ME） 猪脂肪中的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）水平可估计产脂酶（Lipogenic enzyme）活性 猪NADPH的合成由四个酶控制：异柠檬酸脱氢酶（ICDH）、6-磷酸果糖脱氢酶（6PGDH）、苹果酸酶（ME）和葡萄糖六磷酸脱氢酶（G6PDH） Young（1964）认为苹果酸酶和葡萄糖六磷酸脱氢酶是NADPH的主要提供者 苹果酸酶的基因型与肌内脂肪(%) 3、猪MyoG基因型与肌纤维数目关系高勤学、刘梅等（2005） 肌纤维细（即单位面积肌纤维数多）则肌肉品质好 肌纤维形成于胎胚期70d左右，出生后数目不再增加，受生肌调节因子家族（MyoD）调控 MyoD基因家族包括4个结构相关的基因：MyoD1、MyoG（myogenin）、MYF5和MYF6。其中MyoG基因在肌细胞的早期分化过程处于中心位置 不同部位肌肉的MyoG基因不同类型与肌纤维密度（个/mm2） 4、猪白细胞抗原II类基因（SLA-II）中DQ及DR基因的cDNA序列分析（谈永松、周波等，2004） 90年代初-90年代末，MHC I类分子研究（刘根桃、孔令勇、韦习会、黄瑞华等） 00年始， MHC II类分子研究（谈永松、周波等） MHC II类分子的空间结构示意 MHC II类基因形成分子过程示意 研究方法 提取淋巴细胞总RNA，RT-PCR扩增SLA-II类DQA、DQB、DRA及DRB基因，对扩增产物进行克隆测序，获得cDNA全序列 到GenBank中钩出四种基因所在猪基因组序列 将获得的DQ及DR基因的cDNA序列及基因组序列向美国GenBank进行提交 研究进展 二花脸猪8个cDNA序列及基因组序列获得GenBank认可和登记，登录号分别为：AY243100、AY243101、AY243102、AY243103、AY243104、AY243105、AY243106、AY243107以及AY303988、AY303989、AY303990