第七章微生物遗传变异解析.pptVIP

第七章 微生物的遗传变异和育种 现实生活中有哪些现象与遗传变异及育种有关？遗传和变异现象.flv Griffith转化试验示意 质粒的分离与鉴定 分离： 细胞的裂解 质白质和RNA的去除 质粒与染色体DNA相分离 具体方法：碱法，Kit法 鉴定：电泳、电镜 典型质粒 F质粒：E.coli等细菌决定性别并有转移能力的质粒。 R质粒：抗药性质粒。 Col质粒：大肠杆菌素质粒。能抑制或杀死其它近缘细菌。 Ti质粒 Ri质粒 Mega质粒 降解性质粒 （一）突变类型 （三）基因突变特点 1、不对应性：2、自发性：各种突变可以在没有人为的诱变因素下自发发生。3、稀有性：自发突变频率较低，一般10-9~ 10-6 。 4、独立性：5、诱变性： 6、稳定性：遗传物质结构发生的稳定变化，因而产生的新性状也是稳定的，可遗传的。 7、可逆性突变型，为正向突变突变型，为回复突变（回变）。（野生型/突变型） 紫外线对DNA的损伤及其修复 紫外线可使嘧啶形成二聚体，造成局部DNA分子无法配对而使微生物死亡或突变。 可见光对经UV照射后的微生物有光复活作用。原因是光解酶见光后使二聚体重新分解成单体。 二、突变与育种 菌种工作包括三方面：选种、育种、复壮和保藏。 选种—从自然界和生产中选择符合需要菌种。育种—进一步提高已有菌种某种性能，使更符合要求。 （2）、选用优良的出发菌株 用作出发菌株有：野生型菌株；生产菌株；经过诱变的菌株。一般要求生长快，营养要求粗放，发育早，产孢子多，对诱变剂敏感性高，已能积累少量产品或前体物的菌株。 （3）处理单细胞或单孢子悬浮液 原因 第三节 基因重组和杂交育种 基因重组gene recombination：两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定基因组的 过程，称为基因重组（重组） 杂交：细胞水平。细胞水平上的杂交包含了分子水平上的重组。 我国首个基因重组人源化单克隆抗体药物上市.mp4 一、原核生物的基因重组特点：片段性，单向性，多样性（一）转化 概念：受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换，把它组合到自己的基因组中，从而获得供体菌部分遗传性状的现象。转化后的受体菌，称转化子transformant来自供体的DNA片段称为转化因子 。  （二）转导transduction 概念：通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。 普遍转导 局限转导 溶源转变 类似于有性生殖，但比它更为原始的两性生殖方式，这是一种在同种而不同菌株的体细胞间发生的融合，它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。 在自然条件下,真核微生物体细胞间的一种自发性的原生质体融合现象. 第四节 基因工程 定义：利用分子生物学理论与技术，自觉设计、操纵、改造和重建细胞的遗传核心-基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度满足人类活动的需要。 基因工程的主要操作步骤.flv 操作步骤：目的基因的取得、载体的选择、目的基因与载体的体外连接、重组载体导入受体细胞、筛选与鉴定、工程菌的大规模培养 基因工程的应用 基因工程的应用-乙肝疫苗.flv 基因工程的应用与发展前景.flv 本章重点 基因重组的形式及其异同 基因突变与诱变育种 菌种保藏方法 遗传变异 质粒、营养缺陷型、艾姆氏试验 遗传物质基础,原核、真核生物基因重组的方式 基因工程及其操作步骤 一、菌种的衰退与复壮 菌种衰退的原因：基因突变，培养、保藏条件不适，杂菌污染 纯菌种 自发突变 不纯菌种 突变个体 传代增殖 原始个体 衰退菌种 衰退：由于自发突变而使菌种原有生物学性状发生量变或质变的现象。 衰退表现：产量减少，形态、生长速度、感染力、适应性不典型（衰退） 1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有原有典型性状的菌种。 a）纯种分离； b）通过寄主体进行复壮（寄生性微生物） 2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种维护工作中不断筛选“正变”个体。 菌种的复壮： 3）、淘汰已退化个体 二、防止衰退的措施 1）减少传代次数； 2）创造良好的培养条件； 3）利用不易衰退的细胞传代 4）采用有效的菌种保藏方法 三、菌种保藏 目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究、生产、交换之用 国家级菌种保藏机构：CCCCM、ATCC 基本原则： 1、挑选典型菌种的优良纯种 2、尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体 3、创造有利于休眠的保藏环境（如干燥、低温）