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蓖麻细胞悬浮培养技术研究.docVIP

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蓖麻细胞悬浮培养技术研究.doc

蓖麻细胞悬浮培养技术研究   摘要:生长在大冶市铜绿山矿区的野生蓖麻(Ricinus communis L.)是一种新发现的铜超富集植物。为了建立稳定、快速生长的蓖麻悬浮细胞系,以便筛选重金属抗性蓖麻细胞和培育超富集植株,以前期诱导的蓖麻胚性愈伤组织为材料,通过正交试验设计,优化悬浮细胞系的培养条件,建立蓖麻细胞悬浮系,并在优化条件下测定细胞的生长曲线和培养液pH变化。结果表明,   关键词:蓖麻(Ricinus communis L.);胚性愈伤组织;正交试验设计;悬浮细胞系   中图分类号:S565.6 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)04-0932-04   The Cell Suspension Culture of Ricinus communis L.   KANG Wei1,ZHENG Jin1,2   (1.Hubei Polytechnic of University,Huangshi 435003, Hubei,China;2.Hubei Key Laboratory of Mine Environmental Pollution Control Remediation,Huangshi 435003, Hubei,China)   Abstract: Ricinus communis was a new hyperaccumulator growing on Tonglushan copper mine in Daye city. A stable and rapid growth cell suspension culture line of R. communis was established to screen heavy-resistance cell and accumulate plants using embyrogenic cellus with orthogonal experimental design. The results showed that the optimal culturing conditions were MS medium with 0.5 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA + 50 mg/L sucrose + 350 mg/L casein hydrolyzate and 2.0 g(FW)/50 mL inoculation quantity,culture temperature (26±2)℃,drak culture,110 r/min. The best growth rate of the cells were 4.58 g/(50 mL?14 d) and 0.49 g/(50 mL?16 d) under the optimal conditions, respectively. The growing curves of R. communis suspension cell shaped by “S” nearly. The cultutring period was 16 d with the rapid growth phase from 6 to 14 d. The pH trend of culture liquid was declined first and then increased to stable gradually during a culturing period.   Key words: Ricinus communis L.; embyrogenic cellus; orthogonal experimental design; suspension cell line   蓖麻(Ricinus communis L.)属于大戟科(Euphorbiaceae)蓖麻属(Ricinus),在我国各地均有分布,是一种常见的特种油料作物,经济价值较高[1]。近年来,蓖麻在植物修复重金属污染环境方面的作用引起人们的关注。研究报道在液体培养和盆栽条件下,蓖麻幼苗对水体和土壤铜的吸收都达到超富集水平[2,3];蓖麻在重度锌污染的土壤中仍然生长较好,表现出较强的耐受性[4,5];蓖麻叶片可吸收大气中的二氧化硫、二氧化碳,通过种植蓖麻可以减轻大气污染[6]。笔者前期研究证实,在大冶市铜绿山矿区自然散生的野生蓖麻,不仅对土壤铜污染具有较强的耐受性,而且体内能够富集较多的铜,具有铜超积累植物的特征,在修复铜污染土壤中具有较大的潜力[7,8]。但是,由于长期处在重金属污染严重的土壤环境下,与栽培蓖麻的农艺性状相比,这些矿山蓖麻大多株形偏小,结实率低,子粒较小,制约

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