【卓越学案】2017高考生物总复习 第11单元 第37讲 基因工程及其安全性练习.docVIP

第11单元 第37讲 基因工程及其安全性练习 1． 2016·天津武清区调研 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC 1 一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。 2 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越____________。 3 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 4 与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止________________________________________________________________________。 5 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入____________酶。 6 现使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，并经拼接获得的重组质粒进行再次酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1、图2中标示的酶切位点及表中所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。 ①采用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。 ②采用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，得到________种DNA片段。 [导学号座机电话号码]　解析： 1 该质粒为环状DNA，经Sma Ⅰ切割前，不含有游离的磷酸基团，经Sma Ⅰ切割后形成平末端，含有2个游离的磷酸基团。 2 Sma Ⅰ识别的是CCCGGG序列，在C与G之间切割，Sma Ⅰ酶切位点越多，也就是C—G碱基对越多，C与G之间的氢键 3个 比A与T之间的氢键 2个 数量多，其含量越多，质粒的热稳定性越高。 3 据图1可知，Sma Ⅰ切割位点在抗生素抗性基因 标记基因 中，据图2可知，Sma Ⅰ切割位点在目的基因中，因此使用Sma Ⅰ切割会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因。 4 用同一种限制酶处理质粒和外源DNA，再用DNA连接酶连接时，往往会有三种连接形式：目的基因—质粒、目的基因—目的基因 环化 、质粒—质粒 环化 ，后两种是我们不需要的，因而要进行筛选。用两种限制酶处理质粒和外源DNA，因形成的末端不同可避免上述情况的发生。 5 连接质粒与目的基因的工具酶是DNA连接酶。 6 分析由Bam H Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，并经拼接获得的重组质粒，这两种酶的识别序列仍然完整存在，如再用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶进行酶切时，可再度被切开，形成2种DNA片段；而EcoR Ⅰ的识别序列在原质粒中存在并没有被破坏，同时切下的目的基因中还存在1个EcoR Ⅰ的识别序列，因此在重组质粒中存在2个EcoR Ⅰ的识别序列，如用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，可得到3种DNA片段。 答案： 1 0、2　 2 高　 3 Sma会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因　 4 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化　 5 DNA连接　 6 2　3 2． 2016·山东文登模拟 下面是科学家利用现代生物技术研制用于癌症治疗的鼠—人嵌合抗体的流程图。请回答： 1 利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期________________，设计________________，进一步推测应有的氨基酸序列，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其________。在Ig基因表达载体构建的过程中，人和鼠的基因要用____________切割核苷酸之间的磷酸二酯键。 2 图中嵌合载体启动子位于基因的首端，它是______________识别和结合的部位，终止子是________的终点；嵌合载体中还应含有________________，以便重组DNA的鉴定和筛选。 3 图中的“抗体分泌细胞”名称是________，检测目的基因在淋巴细胞中是否得到表达可采用________________技术。 4 在制备单克隆嵌合抗体过程中要进行筛选，第二次筛选的目的是____