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微生物遗传育种学Microbial Genetics南京农业大学食品科技学院别小妹 必修课、36学时 上课时间:1-9周 考试方式: 闭卷 微生物遗传学研究内容 绪论 微生物遗传学的发展简史、建立及应用 微生物遗传学概念 微生物遗传学是以病毒、细菌、小型真菌等微生物为对象，研究微生物遗传和变异的一门学科。 微生物遗传学的形成和发展 微生物遗传学是从经典遗传学发展起来的； 在20世纪40～50年代迅速发展，遗传学中一些基本理论的被阐明； 一、经典遗传学的主要内容 孟德尔（Mendel G. J.，1822~1884,奥地利人） 豌豆杂交试验（1856-1864）： 　%1866年发表《植物杂交试验》,提出了分离规律和独立分配规律； 　%假定细胞中有“遗传因子”，认为遗传是受细胞里的遗传因子所控制的。。 摩尔根（Morgan T.H., 1866－1945） 美国最著名的生物学家，1933年诺贝尔生理学及医学奖获得者 ①. 提出“性状连锁遗传规律”； ②. 提出染色体遗传理论； ③. 著“基因论”：认为基因在染色体上直线排列，创立基因学说。 二、微生物遗传学的发展过程 20世纪40年代以前 20世纪40年代以后 1）细菌变异现象的发现 ①非乳糖发酵大肠杆菌－－－乳糖发酵大肠杆菌 1907，Missini ②大肠杆菌、沙门氏菌：形态、发酵、毒力、生长温度、抗性等变异。 1925, Mellon A 形态结构变异 3-6%食盐鼠疫杆菌────→多形态性 衰残型 。 琼脂培养基 B 形态结构变异 青霉素、溶菌酶正常形态细菌──────→ L型变异 部分或完全失去胞壁  C 毒力变异 β棒状噬菌体白喉棒状杆菌────→ 获得白喉毒素 D 耐药性变异 细菌对某种抗菌药物从敏感变成耐药的变异称为耐药性变异。 金黄色葡萄球菌耐青霉素的菌株已从1946年的14%上升至目前的80%。 含链霉素培基痢疾杆菌─────→依链株 耐药菌株 长期培养 在欧美的发达国家抗生素的使用量大致占到所有药品的10％左右。 而我国最低的医院是占到30％，基层医院可能高达50％ E 菌落变异 在陈旧培养基中长期培养光滑型菌落 ─────→ 粗糙型菌落 S 或在有免疫力的人体内 R 2）肺炎双球菌转化现象 1928，Griffith 英国 转化：某一生物接受了来自另一生物的遗传物质，获得了其遗传性状的现象。 SⅢ和RⅡ肺炎双球菌感染小白鼠实验 2、20世纪40年代以后 微生物遗传学发展成为独立的科学，有5个方面的典型的工作： 1）脉孢菌营养缺陷型的发现 2）细菌的抗药性突变研究 3）细菌接合作用的发现4）转化因子化学本质的证明 5）噬菌体遗传学研究进展 四十年代初比德尔和塔特姆用x-射线处理脉孢菌得到了多种营养缺陷型（维生素 、氨基酸 、碱基等） 　提出“一个基因一种酶”假说 2）细菌的抗药性突变研究 细菌的抗药性来自基因突变还是对环境的适应性变异，是一个长期争论不休的问题。 1943年医生卢里亚和遗传学家德尔布吕克，用波动实验证明了抗药性的出现，也可以在细菌与接触药物以前发生， 表明细菌抗药性也可以源于基因突变。 3）细菌接合作用的发现 1946莱德伯格揭示了另一种与转化不同的细菌基因重组方式----接合作用。 接合作用：由F因子介导的遗传物质单方面转移的现象。 例:从大肠杆菌K12中筛选到突变型SrA- 和野生型SsA+进行接合实验。 SrA-在含链霉素的基本培养基上不生长 SsA+在含链霉素的基本培养基上不生长 SrA-和SsA+混合在含链霉素的基本培养基上生长 推断有SrA+型出现。 中间平板上长出的原养型菌落 是两菌株之间发生了遗传交换 和重组所致！ 4）转化因子化学本质的证明 肺炎双球菌的转化现象在1928年就已发现，可是转化因子的化学本质直到1944年才为美国化学家埃弗里鉴定为DNA。 此后DNA的重要意义才逐渐被认识． 离体实验：从活的S菌中提取各种细胞成分---DNA、蛋白质和荚膜多糖等。对各组分进行转化实验。 活菌 R+S菌DNA---长出S菌 活菌 R +S菌DNA+ DNA酶以外的酶---长出S菌 活菌 R+ S菌DNA+ DNA酶---长出R菌 活菌 R+ S菌RNA--长出R菌 活菌 R+ S菌蛋白质--长出R菌 活菌 R+ S菌荚膜多糖--长出R菌 只有S菌DNA才能够使R型转化成S型。 5）噬菌体遗传学研究进展 1951莱德伯格和津德发现转导作用 转导作用：由噬菌体介导的遗传物质单方面转移的作用 以鼠伤寒沙门氏菌为材料:LT-2 met-his- 和LT-22 phe-trp-tyr- 培养数小时,在LT-22一端出现野生型。 LT-22带有P22