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* 导入方式： 转化 (transformation) 转染 (transfection) 感染 (infection) 表达系统： 基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系，包括克隆载体，表达载体及受体细胞。 据受体细胞的不同可分为： 1．原核表达系统： 将外源基因引入原核细胞，并使其在原核细胞中以发酵形式快速高效地表达、合成基因产物的体系。 2．真核表达系统：使外源基因在真核细胞中表达的体系。 适用于在原核细胞中表达外源基因的载体 优点：能够较短时间内获得基因表达产物而且所需成本相对比较低廉，基因表达多 标准：选择标志 强启动子 翻译调控序列 多接头克隆位点 原核表达体系 (E.coli表达体系最为常用) 外源基因在原核表达系统中表达的必要条件： 删除内含子和5’非编码区 外源基因置于强启动子和SD顺序控制下 维持正确开放阅读框架（ORF） mRNA稳定且可有效转译，形成的蛋白质不被降解 影响外源基因在原核细胞中表达效率的因素： 启动子：建立表达载体时，选择强启动子 基因剂量： 核糖体结合位点： SD顺序与16srRNA3’末端互补程度。 AUG—SD间距离。 AUG后的核苷酸 提高表达水平的手段 1、选择合适载体，提高翻译水平 强启动子----提高转录水平 核糖体结合位点（ATG---SD） 避免产物降解 ：分泌/融合