第六章 高效液相色谱法 6.1 概述 6.2 高效液相色谱仪 6.3 高效液相色谱法的类型 §6-1 概述 与经典液相色谱的比较 与气相色谱的比较 ① 气相色谱的流动相是色谱惰性的,不参与分配平衡过程,而液相色谱中流动相参与固定相争夺样品分子,为提高选择性增加了一个因素。 ② 液相色谱固定相类型多,如离子交换色谱和排阻色谱等,作为分析时选择余地大;而气相色谱并不可能的。 ③ 液相色谱通常在室温下操作,较低的温度,一般有利于色谱分离条件的选择。 3、液相色谱中制备样品简单,回收样品也比较容易,而且回收是定量的,适合于大量制备。 4、液相色谱缺乏通用的检测器,仪器比较复杂,价格昂贵。 为了获得高柱效,高效液相色谱使用粒度很小的固定相(10μm),因此对流动相阻力很大,为使流动相较快流动,必须配备有高压输液系统。它是仪器最重要的部件:由储液罐、高压输液泵、过滤器、压力脉动阻力器等组成。 对高压泵的要求:密封性好,压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。 进 样 系 统 高效液相色谱柱比气相色谱柱短得多(约5-30cm),所以柱外展宽(即柱外效应)较突出。进样系统是引起柱前展宽的主要因素,因此高效液相色谱法中对进样技术要求较严。 进样方式:注射器进样、阀进样、自动进样器。 分离系统——色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件,它包括柱管与固定相两部分。柱管材料
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