拟除虫菊酯类农药半抗原合成及酶联免疫分析.docVIP

拟除虫菊酯类农药半抗原合成及酶联免疫分析 　　摘要：酶联免疫分析（ELISA）是农药残留检测的一种重要方法，具有方便快速、特异灵敏等优点。主要介绍了拟除虫菊酯类农药半抗原的合成方法，对拟除虫菊酯分子的环丙烷、氰基和芳香环进行修饰；对拟除虫菊酯水解产物进行修饰；增加一个连接臂作为半抗原。同时介绍了酶联免疫分析的研究进展，对拟除虫菊酯类农药半抗原的合成及酶联免疫分析进行了讨论和展望。酶联免疫分析在拟除虫菊酯类农药的残留检测中将起到越来越重要的作用。 　　关键词：拟除虫菊酯；半抗原；酶联免疫分析（ELISA） 　　中图分类号：S482.3；Q503 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）05-0993-04 　　Hapten Synthesis and ELISA Analysis of Pyrethroid Pesticides 　　HU Jiu-ping1，2，LI Xiang-qian1，3，REN Shi-ying1，3，ZHOU Li-hong2 　　（1.Huaiyin Institute of Technology， Huai’an 223003，Jiangsu，China；2.College of Life Science， Guizhou University，Guiyang 550025，China； 　　3. Huai’an High-Tech Research Institute， Nanjing University，Huai’an 223003， Jiangsu， China） 　　Abstract： A enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA） is an important method to detect the residue of pesticides with the characteristics of convenience and high efficiency. The main synthesis methods of hapten include modifying the cyclopropane， cyanogroup and aromatic nucleus of the pyrethroid insecticides， modifying the hydrolysate of the pyrethroid insecticides or adding a linker arm. Research progress in ELISA analysis was reviewed， and the methods of hapten synthesis and the application of ELISA were discussed. ELISA will be a promising method and play more and more important role in detecting the residue of pyrethroid insecticides. 　　Key words： pyrethroid； hapten； enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA） 　　拟除虫菊酯类农药是一类重要的合成型杀虫剂[1]，它具有高效、低毒、低残留等特点，如今被广泛用于农业、林业、公共卫生等方面。但随着拟除虫菊酯类农药的大量使用，其残留对环境和人类健康造成的危害，特别是在农产品和食品中的残留问题不断引起全社会的关注[2]。如今对于拟除虫菊酯残留的分析检测多以高效液相色谱（HPLC）、气相色谱-电子捕获法（GC-ECD）以及气相色谱-质谱（GC-MS）等仪器分析的方法为主。虽然这些方法检测灵敏度高，但样品的前处理步骤多且检测费用高，不适用于现场快速检测。这些问题促使人们不得不寻找一种新的快速检测方法。20世纪80年代以来，免疫学技术在农药残留检测中的应用不断深入，其中酶联免疫分析（ELISA）技术是检测农药残留较好的方法，它提供了一种对痕量残留快速、灵敏、选择性的检测方法。酶联免疫的关键技术是半抗原的设计、合成和抗体制备[3]。 　　1 半抗原的合成 　　拟除虫菊酯类农药多是相对分子质量小于1 000的化合物，其本身不具有诱导产生抗体的能力。且拟除虫菊酯分子也往往不能直接与双功能交联剂或蛋白质共价偶联，因此需要先通过化学反应在拟除虫菊酯分子上引入活性基团由此合成半抗原再与蛋白质偶联得到抗体[4]。目前半抗原的设计及合成主要有以下几种途径。 　　1.1 对拟除虫菊酯上活性位点的修饰 　　1.1.1 对拟除虫菊酯环丙烷的修饰 Lee等[