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第九组 泌尿外科专业 胡亮亮 陈刚 王猛 孙猷 肿瘤专业： 单风晓 乔云 张莹莹  VHL基因的研究进展及在肾癌基因治疗中的应用 Prograss of VHL Gene and Its Applicayion in the Gene Therapy for Renal Cell Carcinoma 背景 One:肾透明细胞癌 背景 治疗： 　　1.手术治疗——目前主要手段 　　2.免疫疗法和化疗并用 　　3.术后治疗 　　 背景 two:VHL基因潜力 其得名于Von Hippel-Lindau(VHL)病 定位于染色体3p25-26 为抑癌基因，该基因的失活会导致正常的VHL蛋白合成障碍，这与肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,CCRCC）的发生发展有着密切的关系。 背景 VHL基因的失活机制:包括基因突变，杂合性缺失和甲基化。 1. VHL基因的结构与产物 VHL基因的结构: VHL基因定位于染色体3p25-26区，含有14543bp，包含3个外显子和2个内显子（图1），转录的mRNA长度为4859bp，包括5和3端的非翻译区 。 VHL基因的编码产物： VHLmRNA编码两种不同的蛋白质，pVHL30和pVHL19，分子量分别为30kD和19kD，各由213个氨基酸和180个氨基酸组成，pVHL19是在VHL基因的第二转录起始位点（54号密码子）上转录形成的，pVHL30和pVHL19的不同之处在于前者有8个氨基酸末端重复的存在。 VHL蛋白的二级结构由位于N-末端7个β折叠和C端的4个α螺旋构成。其中3个α螺旋位于蛋白的一侧，构成了α区；另外4个β折叠和1个α螺旋位于一侧，构成了β区。这两个区域包含不同的蛋白结合位点：α区可以与转录延长因子B、C（ElonginB、C）复合物相连接，β区可以与缺氧诱导因子1α（HIF-1α）等底物分子相连接，这两个区域的完整对VHL蛋白的功能有重要意义。 2. VHL基因的功能 2.1 VHL基因与Wnt-β-catenin信号通路的调控 2.2 VHL基因介导HIF的降解调控细胞因子转录 2.3 VHL基因与氧化磷酸化的调控 2.1VHL基因与Wnt-β-catenin信号通路的调控 1. Wnt/β-catenin信号转导通路的激活可以促进癌症的发生发展。 2. pVHL与Wnt/β-catenin信号转导通路通过Jade-1的作用连接起来。 pVHL对Jade-1的稳定性起促进作用，Jade-1可以通过泛素化作用降解β-catenin，从而使Wnt/β-catenin致癌信号通路受到抑制。 3.β-catenin可以促进肝细胞生长因子HGF的转录和表达，从而提高肾癌细胞的侵染能力。 因此，β-catenin可以作为肾透明细胞癌诊断与预后的一个分子标志物，也可以作为治疗肾透明细胞癌的靶点。 2. VHL基因的功能 2.2VHL基因介导HIF的降解调控细胞因子转录 VHL基因通过介导缺氧诱导因子（HIF）的降解来调控细胞因子转录的分子机制已被证实。 pVHL首先与ElonginB、ElonginC、Cul2以及Rbxl组成E-3泛素连接酶复合体，然后再与HIF-α结合，在常氧状态下，HIF的α亚单位可以被3个不同的脯氨酸酰羟化酶羟基化，进而被E-3泛素连接酶复合体泛素化，进而被降解。相反，在缺氧情况下，低氧阻止羟基化的发生，HIF的α亚单位被转移至核内，与VHL蛋白的β亚单位结合，进而诱导一些包含缺氧反应元件（HRE）的基因表达。 Derek等分析了99例肾透明细胞癌患者的内皮生长因子受体（EGFR）和转移生长因子（TGF-α）的表达情况，发现在VHL基因突变的患者中EGFR和TGF-α表达量较高。TGF-α的高表达会引起肾透明细胞癌中的EGFR/PBK/AKT/IKKα/ NK-κB这一信号级联反应，激活转录因子NK-κB，NK-κB与癌细胞的增殖、侵染、抗凋亡有着密切的关系。 因此可以通过调控HIF的降解与多个相关的