皮肤敷用的纳米剂增加生物利用度.doc

皮肤敷用的纳米乳剂增加生物利用度 T. Kotyla a, F. Kuob, V. Moolchandani c, T. Wilson a, R. Nicolosi a, 摘要 本研究的目的是比较敷用的丁型生育酚的纳米乳剂和微米乳剂,因为这涉及到粒子大小和生物利用度。使用七只F1B叙利亚金色的仓鼠分别进行实验,相隔1星期。制备两种乳剂都用到了菜籽油,吐温80、去离子水和丁型生育酚，唯一的区别是在制备纳米乳剂时使用了微流化处理器。都是按配方制成膏状物，敷用在仓鼠刮过皮毛的背部区域。微米乳剂的粒径是2788纳米而纳米乳剂的粒径是65纳米。两小时后，敷用纳米乳剂的仓鼠血浆中生育酚浓度相对基线明显增加了36倍，而敷用微米乳剂的仓鼠只增加了9倍。在敷用3 h后，分别比较的基线，纳米乳剂作用的仓鼠血浆生育酚显著提高了68倍,而敷用微米乳剂的仓鼠血浆生育酚只提高了11倍。分别敷用纳米乳剂和微米乳剂2和3 h后同样观察到显著的差异。这项研究表明纳米乳剂显著提高丁型生育酚透皮敷用的生物利用度。, 1 引言 维生素E被假设可以减少与氧化应激效应有关的疾病的发病率和严重性，比如实验性的动脉粥样硬化，癌症，慢性炎症和神经紊乱等(Brigelius-Flohe et al., 2002)，因为它具有抗氧化能力。而且,大量证据表明维生素E由于阻止亚硝胺的形成，从而可以减少自发发生的DNA氧化损伤及抑制早期阶段的致癌作用(Ohshima et al., 1982; Azzi et al., 1995; Moore et al.，1999)。其他研究表明，维生素E类化合物对肿瘤及肿瘤细胞的生长有直接的抵抗作用(Kline et al.,2001)。此外，据报道，一些生育酚的同分异构体，尤其是γ-生育酚,有抗炎症的特性(Grammas et al., 2004; Singh and Jialal, 2004; Singh et al., 2005)，因此，一个可以增强生物利用度和功效的递药系统，比如生育酚对营养制品和药物制剂的医学应用有很大的价值。 脂质为基础的纳米剂型是改善药物溶解度和靶向作用非肠胃用药的最佳待选材料(Moghimi and Agrawal, 2005)。纳米乳剂是一类由表面活性剂和水中的油状悬浮物组成的稳定乳剂，粒径通常小于100纳米(Becher, 1983; Porrasa et al., 2004; Sonneville-Aubrun et al., 2004).。报道纳米乳剂的稳定性使它们常常被描述为“接近热力学稳定性”(Tadros et al., 2004).。这表明乳剂系统可以作为溶解性差的药物的配方替代品，如药物如紫杉酚和胺碘酮 (Constantinides et al., 2004)。 相对于典型的微米乳剂，纳米乳剂粒径约100 nm的递药系统，能提高多数化合物的生物利用度和有效性的，如消炎药的化合物(Kumar et al., 2004),胰岛素(Yan et al., 2002),破伤风类疫苗(Vila et al., 2005)和双香豆素(Thanos et al., 2003). 对纳米乳剂递药系统的效果的证明来自我们实验室, 相对于微米乳剂的配方（ASF），在微流化处理器上制备的纳米乳剂含有抗氧化剂协同配方(ASF)，显著减少鼠模型的神经母细胞瘤中肿瘤的大小(Kuo et al.,2007)。 2材料和方法 2.1纳米乳剂和微米乳剂的配方 纳米乳剂是由三种物质混合制成：丁型生育酚（西格玛奥德里奇公司,密苏里州,美国)(4.62mg/ml)溶解在10 g菜籽油和10 g吐温80中(西格玛奥德里奇公司,密苏里州,美国)。丁型生育酚和α-生育酚被用在该研究中，因为仓鼠体内血流本底水平非常低,从而更容易测定微米乳剂和纳米乳剂作用下生育酚的增加量。加热溶液(50?C)，并用电磁搅拌器轻轻地搅10分钟。加热二百四十毫升蒸馏水 (60?C)，然后加入到该溶液中。继续搅拌20分钟，使溶液均衡。型号为M-110EH的微流化处理器用来制备丁型生育酚的纳米乳剂（微流体公司，美国）。微流化处理器通过加速产物通过微通道来提供高压力及高剪切速率，使产物快速被磨细到纳米范围。将流体一分为二，以75微米的尺寸高速(50 - 300米/秒)推进微通道。流体喷出微通道时会与反向的流体碰撞，流体在通道里经历了的高剪切率（107 L/s），数量级上优于传统技术。流体碰撞导致亚微粒水平的混合。因此，高剪切率和撞击是导致粒径减小和微流化处理器中多相流体混合的因素。 在该研究中，生育酚的纳米乳剂配方以24000psi的压力通过微流化处理器，而制备微米乳剂的配方不经过微流化处理器。 2.2 粘度和粒径 乌氏粘度计（波士顿，MA，美国）用来测定配方粘度，25?