完成稿高效液相色谱要点分析.docVIP

项目任务书2 项目名称 高效液相色谱分析方法 知识目标 1.掌握六种高效液相色谱分析方法的定义、分离原理、应用。 六种方法分别为：液液分配色谱法、液固吸附色谱法、离子色谱法、离子对色谱法、离子交换色谱法、空间排阻色谱法。 能力目标 1.根据待测样品的结构和特点选择合适的液相色谱分析方法。 2.培养学生独立阅读猎取知识的能力。 3.培养学生具有良好的叙述表达能力。 计划完成时间 2015.9.17-2015.9.24 完成形式 小组代表发言+全班讨论+教师总结 小组成员 参考文献资料 知识目标考核 讨论课的形式进行，选择六个小组，分别由一名同学完成本小组所承担的分析方法的讲解，然后全班讨论。 根据各小组完成情况，教师打分。 分数（满分5分） 能力目标考核 笔答：回答各不同种类样品所采用的高效液相色谱分析方法是什么？并分别回答该方法的分离原理。 分数（满分5分） 合计： 心得 考核办法：根据学生完成情况，教师打分。 液液分配色谱法 基于被测物质在固定相和流动相之间的相对溶解度的差异，通过溶质在两相之间进行分配以实现分离。根据固定相与流动相的极性不同，分为正相色谱和反相色谱。前者是用硅胶或极性键合相为固定相，非极性溶剂为流动相；后者是硅胶为基质的烷基键合相为固定相，极性溶剂为流动相，适用于非极性化合物的分离。 式中，K是分配系数，k为容量因子，和分别是溶质在固定相和流动相中的浓度，Vm和Vs分别是流动相和固定相的体积。 原理 液-液分配色谱法与气-液分配色谱法之间有相似之处，即分离的顺序决定于分配系数的大小，分配系数大的组分保留值大。 在液-液色谱法中，一般为了避免固定液流失，对于亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性，这种情况称为正相液-液色谱法。反之，若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液--液色谱法。后者的出峰顺序与正相液-液色谱相反。 为了更好的解决固定液从载体上流失的问题，将各种不同有机基团通过化学反应共价键合到硅胶（担体）表面上的游离羟基上，代替机械涂渍的液体固定相，从而产生了化学键合固定相，为色谱分离开辟了广阔的前景。 应用 自20世纪70年代末以来，液相色谱分析工作大多在化学键合固定相上进行的，它不仅用于反相色谱法、正相色谱法，还用于离子色谱法离子对色谱法等色谱技术上。其中特别是反相化学键合相色谱法，，由于操作简单，色谱分离过程稳定，加之分离技术灵活多变，已成为高效液相色谱法中应用最广泛的一个分支，而液-液分配色谱则极少采用 液固吸附色谱法 色谱分离是基于吸附效应的色谱法成为吸附色谱法以固体吸附剂为固定相以液体为流动相的色谱法称为液-固吸附色谱法简称液-固色谱法。 流动相为液体，固定相为吸附剂，这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的 分离原理:当流动相通过固定相（吸附剂）时，吸附剂表面的活性中心就要吸附流动相分子。同时，当试样分子（X）被流动相带入柱内，只要它们在固定相有一定程度的保留就要取代数目相当的已被吸附的流动相溶剂分子）于是，在固定相表面发生竞争吸附: X液相+ nS固相= X固相+ nS液相X液相X固相S液相达平衡时，有 式中，K为吸附平衡常数，亦即分配系数，上式表明，如果溶液分子吸附性更强，则被吸附的溶质分子将相应的减小。显然，分配系数大的组分，吸附剂对它的吸附力强，保留值大。 应用 液-固色谱法适用于分离相对分子适量中等的油性试样，对具有不同官能团的化合物和异构体有较高的选择性。凡能用薄层色谱法成功的进行分离的化合物，亦可用液-固色谱法进行分离。缺点是由于非线性等温吸附常引起峰的拖尾现象。 离子色谱法 离子色谱法是在离子交换色谱法的基础上于20世纪70年代中期发展起来的液相色谱法，并快速发展成为水溶液中阴离子分析的最佳方法该方法利用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相。通常以电导检测器为通用检测器为了消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。例如在阴离子的分析过程中，试样通过阴离子交换树脂时，流动相中待测阴离子（以Br-为例） 式中，R代表离子交换树脂。在阴离子分离中，最简单的洗脱液是NaOH，洗脱过程中，OH-从分离柱的阴离子交换位置置换待测阴离子Br-。+型阳离子交换树脂的抑制柱，则在抑制柱上将发生两个非常重要的反应： 由此可见，从抑制柱流出的洗脱液中，洗脱液（NaOH）已被转变成电导值很小的水，消除本地电导影响，试样阴离子则被转变成其相应的酸，由于H+的离子淌度7倍于Na+，这就大大提高了所测阴离子的检测灵敏度。 在阳离子的分析中，也有相似的反应。此时阳离子交换树脂作为分离柱，