食用菌栽培技术础性实验.doc

植物生产国家级实验教学示范中心 《实验》 实验项目 每组人数 必选/可选 1 食用菌形态结构的观察 母种培养基的配制 3 必选 3 高压蒸汽灭菌 4 必选 4 母种的转管及分离技术 1 必选 5 主要病虫害的识别 3 必选 实验一、食用菌形态结构的观察 常见与栽培的食用菌主要是担子菌亚门层菌纲和腹纲的一些种类，它们由双核菌丝分化形成子实体，子实体是有性孢子着生的器官其孢子外生在担子上，并聚集成一层子实层，但它们的子实体（担子实）形状因种类不同而有很大差别，故为我们认识食用菌类别的主要标志之一。一、目的要求 ????使学生能找出食用菌次生菌丝的特征，分辨伞菌的微观构造；熟练制作标本片，能在显微镜下快速找出目标；并能分析图像不清的原因或排除显微镜的某些故障。 二、仪器及实验材料 1. 器具光学显微镜、尖头镊子、解剖刀、解剖针、解剖剪、刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯、火柴、蕃红染色剂、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等。 2. 材料平菇、草菇、香菇、蘑菇、金针菇等食用菌的斜面菌种与平板菌落，及其各种鲜子实体，胡萝卜。三、实验内容 1.次生菌丝体的观察（菌苔形态及微观形态的观察） ????2.子实体的观察（外观形态及菌褶微观构造的观察） 方法步骤 1、次生菌丝体的观察 （1）肉眼观察从颜色、菌丝生长势、爬壁力、有无无性孢子、菌苔边缘特征等方面进行识别。 ?? （2）显微镜观察制片：在载玻片中央滴蕃红，用无菌接种针拨去气生菌丝，取其下绿豆粒大一薄片培养基置于蕃红染液中。放盖片，颠吸水纸后用手指适当按压，将培养基压碎，使其均匀平展于载玻片上。 镜检：将标本片固定于载物台上，低倍镜下找理想目标，高倍镜下观察菌丝的分支、分隔、锁状联合等特征。 ?? 2.子实体的观察 （1）肉眼观察先观察完整子实体，从颜色、大小、及其菌盖、菌褶、菌柄、菌环、菌托等特征将各菌类的子实体进行比较识别。用解剖刀纵切子实体，观察菌盖和菌柄等部分的组成。从菌肉颜色、质地、菌褶着生情况；菌柄的质地、粗细、是否中实等方面进行比较。（2）微观观察切片：用尖头镊子取一小块菌褶，将其夹于胡萝卜条的切线中间，用刀片横切，切下的切片放入有蒸馏水的培养皿中，切片要求薄而均匀。制片：载玻片中央滴蒸馏水，用解剖针挑取最薄的切片放于载片水滴中，放盖片。镜检：将标本片固定于载物台上，用低倍镜找理想目标，再用高倍镜观察子实层、担子和担孢子的形态、大小及排列状况。 ?????? 四、实验报告. 表格总结平菇、蘑菇、草菇、金针菇、香菇等子实体各部分的宏观特征. 出次生菌丝、担子、担孢子及子实层的图像实验二、母种培养基的配制 母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。一、目的要求 掌握固化培养基的配制，学会棉塞的制作方法。分析有天然原料与无天然原料培养基在配制过程中的不同。 二、仪器及实验材料 1.器具天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。 2．材料马铃薯、葡萄糖或蔗糖、麸皮、琼脂、水。 ?三、实验内容 1.制马铃薯滤液 2.融化琼脂 3.培养基的分装 4．棉塞的制作 方法步骤 1．配方（PDA）马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。 2．制作方法 （1）制滤液??马铃薯刮去粗皮，去芽眼，切成碎块，称量后放锅中，加水1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层纱布过滤，取1000ml滤液。 （2）化琼脂??将滤液加热至即将沸腾时加入琼脂，不断搅拌（控制火力不要使培养基溢出或烧焦）。琼脂完全融化后加入剩余原料，并使其溶解（用热水足水量）。 （3）分装??通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试管中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶，其装量以不超过其容积的一半为宜）。管口或瓶口不要沾染培养基。 （4）制棉塞??棉花以白色长绒的不脱脂棉花为宜。根据试管口大小取棉花，将其卷成棉塞，最好外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞长度约6~7cm，塞入试管2/3。要求外表光滑，外包的纱布无皱折，松紧适宜等。 A.正确; B.不正确 （5）?包扎??管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。 四、实验报告1.制取母种培养基时，配方中的天然原料应怎样处理？????2.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？????3.分装的技术要求有哪些？????4.棉塞的作用和技术要求有哪