第06章生物氧化探索.ppt

（一）胞浆中NADH通过穿梭机制进入线粒体氧化呼吸链 胞浆中NADH必须经一定转运机制进入线粒体，再经呼吸链进行氧化磷酸化。 α-磷酸甘油穿梭 α-glycerophosphate shuttle 苹果酸-天冬氨酸穿梭 malate-asparate shuttle 转运机制： 1、α-磷酸甘油穿梭主要存在于脑和骨骼肌中 NADH+H+ FADH2 NAD+ FAD 线粒体 内膜 线粒体 外膜 膜间隙 线粒体 基质 α-磷酸甘油 脱氢酶 呼吸链 磷酸二羟丙酮 α-磷酸甘油 2、苹果酸-天冬氨酸穿梭主要存在于肝和心肌中 NADH +H+ NAD+ NADH +H+ NAD+ 谷氨酸- 天冬氨酸 转运体 苹果酸-α-酮 戊二酸转运体 苹果酸 草酰乙酸 α-酮戊二酸 谷氨酸 苹果酸 脱氢酶 谷草转 氨酶 胞液 线 粒 体 内 膜 基质 呼吸链 天冬氨酸 （二）ATP-ADP转位酶促进ADP进入和ATP移出紧密偶联 ATP4- F0 F1 胞液侧 基质侧 腺苷酸 转运蛋白 磷酸 转运蛋白 ADP3- H2PO4- ATP4- H+ H+ H+ H+ H2PO4- H2PO4- ADP3- ADP3- 每分子ATP4-和ADP3-反向转运时，向内膜外净转移1个负电荷 ，相当于多1个H+转入线粒体基质。 第二节 其他不生成ATP的氧化体系 The Others Oxidative Enzyme Systems without ATP Producing 一、抗氧化酶体系有清除反应活性氧类的功能 反应活性氧类 reactive oxygen species, ROS O2 e- O·-2 e-+2H+ H2O2 e-+H+ OH· H2O e-+H+ H2O 反应活性氧类 ROS主要来源 线粒体：超氧阴离子O·-2，是体内O·-2的主要来源； O·-2在线粒体中再生成H2O2和·OH。 过氧化酶体：FAD将从脂肪酸等底物获得的电子交给O2生成H2O2和羟自由基·OH。 胞浆需氧脱氢酶（如黄嘌呤氧化酶等）也可催化生成O·-2。 细菌感染、组织缺氧等病理过程，环境、药物等外源因素也可导致细胞产生活性氧类。 需氧脱氢酶和氧化酶 抗氧化酶体系 1、过氧化氢酶 catalase 又称触酶，其辅基含4个血红素 2H2O2 2H2O + O2 过氧化氢酶 可去除细胞生长和代谢产生的H2O2和过氧化物 R-O-OH ，是体内防止活性氧类损伤主要的酶。 2、谷胱甘肽过氧化物酶 glutathione peroxidase，GPx H2O2 + 2GSH → 2 H2O +GS-SG 2GSH + R-O-OH → GS-SG + H2O + R-OH 谷胱甘肽过氧化物酶 H2O2 ROOH H2O ROH+H2O 2G –SH G –S – S – G NADP+ NADPH+H+ 此类酶可保护生物膜及血红蛋白免遭损伤。 谷胱甘肽还原酶 含硒的谷胱甘肽过氧化物酶 3、超氧化物歧化酶 2O2﹣+ 2H+ SOD H2O2 + O2 H2O + O2 过氧化氢酶 SOD：超氧化物歧化酶 superoxide dismutase 二、微粒体细胞色素P450单加氧酶催化底物分子羟基化 RH + NADPH + H+ + O2 ROH + NADP+ + H2O 上述反应需要细胞色素P450 Cyt P450 参与。 细胞色素P450单加氧酶 cytochrome P450 monooxygenase ，又称混合功能氧化酶 mixed-function oxidase 或羟化酶 hydroxylase 细胞色素P450单加氧酶作用机制 二、氧化磷酸化将氧化呼吸链释能与ADP磷酸化生成ATP偶联 氧化磷酸化 oxidative phosphorylation 是指在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化，生成ATP，又称为偶联磷酸化。 底物水平磷酸化 substrate level phosphorylation 与脱氢反应偶联，生成底物分子的高能键，使ADP GDP 磷酸化生成ATP GTP 的过程。不经电子传递。 ATP生成方式 （一）氧化磷酸化偶联部位在复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ内 根据P/O比值 自由能变化: ⊿Go -nF⊿Eo 氧化磷酸化偶联部位：复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ 线 粒 体 离 体 实 验 测 得 的 一 些 底 物 的 P/O 比 值 底 物 呼 吸 链 的 组 成 P/O 比 值 可 能 生