药物的镇痛作用实验2).docVIP

药物的镇痛作用 目的与要求 学习常用的三种疼痛实验模型的制作。 观察哌替啶的镇痛作用。 实验原理 疼痛是临床的常见症状，疼痛除了由于伤害性刺激所引起的情绪反应外，往往还表现出自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等。痛觉不仅具有较大的个体差异，而且同一个体在不同条件下的痛觉也不同。痛觉的观察指标容易受主观因素的影响，目前常用一种衡量痛觉敏感性的指标即痛觉阈值（简称痛阈值）客观地对痛觉做出描述。 解热镇痛药、镇痛药及麻醉药等是目前临床上常用的具有镇痛作用的药物，可通过提高痛觉阈值达到镇痛的目的。 疼痛实验模型的制作，常用的方法有：热刺激、化学刺激、机械刺激及电刺激等 热板法 实验材料 实验动物 雌性小鼠（18～22 g）6～7只。 二．器材与药品 Woolfe热板、天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。 实验方法 筛选实验动物 将热板温度调节至（55±0.5）℃，置小鼠与热板上，测定各小鼠的正常痛反应（舔后足或抬后足并回头）时间，共2次，每次间隔5min，该时间即为小鼠的痛阈值，以平均值不超过30s为合格，共选出6只小鼠供实验用。 动物分组及给药 取选出的6只小鼠，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重编号。按上述方法分别测定小鼠给药前的痛阈值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注视3%安乃近300mg/10g（0.1ml/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。于注射后15min、30min、45min分别再次测定实验组和对照组各小鼠痛阈值。对60s不舔后足、不抬后足并回头的小鼠，痛阈值按60s计算。 结果计算 收集整个实验室结果，按下列公式计算不同时间的痛阈改变百分率。 痛阈改变百分率= 将小鼠给药前、后的痛阈值记入表13-4。并计算各时间点的痛阈改变百分率。以时间为横坐标、痛阈改变百分率为纵坐标，绘出用药后15min、30min、45min小鼠的痛阈改变百分率时效曲线（图13-2）。 表13-4 盐酸哌替啶、安乃近对小鼠痛阈值的影响 动物数 给药前痛阈值（s） 给药后痛阈值（s） 15min 30min 45min 实验组1 实验组2 对照组 图13-2 痛阈改变百分率时效曲线 注意事项 热板法要求必须用雌性小鼠。因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易于热板接触而影响实验结果。 热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。以痛阈值在30s以内为敏感鼠，供实验用。 用药后小鼠痛阈值超过60d者应立即取出，以防烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s计算。 化学刺激法 实验材料 实验动物 雌性小鼠（18～22 g）6～7只。 器材与药品 天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。 实验方法 取体重相近的小鼠6只，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重，并观察各组小鼠的活动情况。 实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注射3%安乃近300mg/10g（0.1ml/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。 给药后20min，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g（或1%酒石酸锑钾溶液0.1ml/10g），观察15min内各组出现扭体反应（腹部收缩内凹、躯干后肢伸张、臀部高起）的动物数。 结果计算 收集整个实验室结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率。 药物镇痛百分率= 表13-5 盐酸哌替啶、安乃近对小鼠化学刺激致扭体反应的影响 动物数 扭体反应数 无扭体反应数 实验组1 实验组2 对照组 注意事项 酒石酸锑钾或醋酸需临用时配置。存放过久，将导致作用明显减弱。 哌替啶给药剂量要准确。剂量过大抑制呼吸，剂量过小不发挥作用，均会影响实验结果。 三、甩尾法 实验材料 一、实验动物 雌性小鼠（18～22 g）6～7只。 二、器材与药品 热辐射刺激仪、天平、鼠笼、小鼠固定器、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。 实验方法 1、筛选实验动物 将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，打开灯光，光束直射于鼠尾1/3处，观察小鼠甩尾动作，记录出现甩尾动作的时间作为小鼠痛阈值。选出6只在6s内出现甩尾动作的小鼠供实验用。超出6s的小鼠应弃