HPLC法测定盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中有关物质的含量.docVIP

HPLC法测定盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中有关物质的含量 　　[摘要] 目的 建立高效液相法测定盐酸葡萄糖注射液中有关物质。方法 采用高效液相色谱法测定已知杂质A，B，C，D，E和未知单杂。使用BDS HYPERSIL C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇（0.50g/L四丁基硫酸氢铵，1.0g/L磷酸二氢钾和3.4g/L磷酸混合溶液；28∶72）为流动相。流速：1.5mL/min，检测波长：293nm。结果 盐酸莫西沙星进样质量在0.1259～5.036μg/mL（r=0.9992），浓度范围内，供试品溶液的浓度与峰面积线性良好。精密度：RSD为0.78%；最小检出限为0.74ng。定量限：供试品溶液峰面积的RSD%为4.24，最小定量限为2.53ng。溶液稳定性：供试品溶液及其对照溶液在8h内稳定。结论 该方法简便、专属性好、灵敏度高，可用于盐酸莫西沙星葡萄糖注射液中有关物质的检测。 　　[关键词] 盐酸莫西沙星；葡萄糖注射液；HPLC法 　　[中图分类号] R978.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）18-116-03 　　莫西沙星作为超广谱氟喹诺酮类抗菌药物，作用于细菌的两个靶位即拓扑异构化酶Ⅱ和Ⅳ，所以本品不仅对敏感的细菌有效，而且对耐药菌株也有高度活性。临床上对多种感染显示优良的治疗效果[1]。近几年，由于空气污染等多种原因，我国呼吸系统感染发病率直线上升，本品在此领域内有显著优势，需求量稳步攀升。本品已逐渐成为治疗呼吸道感染的重要药物。 　　盐酸莫西沙星的进口产品为拜复乐注射液，中文名称为“盐酸莫西沙星氯化钠注射液”[2]由于德国拜耳的专利限制，目前国内尚无原料药及制剂生产，国内上市品种为拜耳医药的盐酸莫西沙星片及盐酸莫西沙星氯化钠注射液[3-4]，尚无盐酸莫西沙星葡萄糖注射液生产，更无关于其有关物质的测定的文献报道。本文采用公司研制的盐酸莫西沙星葡萄糖注射液，用反相高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星的有关物质，结果证明该法专属性强，重现性好，为制剂的质量控制提供了方法学依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　戴安U3000高效液相色谱仪，检测器：VWD检测器，工作站：变色龙软件；LC-10AT 电子天平。 　　1.2 试药 　　溶剂：0.50g四丁基硫酸氢铵和1.0g磷酸二氢钾溶于500mL水，加2mL磷酸和0.050g无水亚硫酸钠，加水稀释至1000mL。杂质对照品：已知杂质A，B，C，D，E样品：自制的盐酸莫西沙星葡萄糖溶液。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：BDS HYPERSIL 4.6mm×250mm，5μm；流动相：甲醇（0.50g/L四丁基硫酸氢铵，1.0g/L磷酸二氢钾和3.4g/L磷酸混合溶液；28∶72）。 　　检测波长：293nm；柱温：40℃；流速：1.5mL/min；进样量：20μL；理论板数不低于3500。 　　2.2 供试品溶液和对照溶液的制备 　　称取供试品3mL，置于10mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1mL，置于10mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置于100mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 　　2.3 检测方法 　　精密量取对照溶液20?L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的5%～10%；再精密量取供试品溶液和对照溶液各20?L分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍。 　　单个未知杂质=A单个未知/A对照×100% 　　计算公式：总杂=（A总-A主）/A对×100% 　　2.4 线性 　　称取供试品25mg，置于50mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，量取1mL，置于100mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为线性储备液； 　　分别量取上述储备液2.5、5、10、30mL，分置于100mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为线性测试溶液1、2、3、4； 　　精密量取上述线性测试溶液1、2、3、4线性储备液各20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表1。 　　2.5 精密度试验 　　取供试品25mg，置于50mL棕色容量瓶中，加溶剂使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置于10mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置于100mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液； 　　精密量取上述供试品溶液20?L，注入液相色谱仪，连续进样6次，结果见下表2。 　　2.6 定量限 　　取供试品25mg，置于50mL棕色容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀；量取1mL，置于100